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美國(guó)avivasystemsbiology抗體常用的抗體純化方法及其相關(guān)原理

時(shí)間:2022-3-23 閱讀:2066
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  美國(guó)avivasystemsbiology抗體是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)*特征,該外來(lái)目標(biāo)被稱(chēng)為抗原。
  我們知道,一般免疫血清中含有特異性抗體和非特異性抗體,血清蛋白以及其他各種雜蛋白等,在制備特異性抗體過(guò)程中當(dāng)抗體的效價(jià)達(dá)到實(shí)驗(yàn)預(yù)期之后,我們所制備的美國(guó)avivasystemsbiology抗體的純度關(guān)鍵取決于所選擇的純化方法。
  美國(guó)avivasystemsbiology抗體常用的抗體純化方法及其相關(guān)原理。
  1、沉淀法:
  硫酸銨/辛酸沉淀法是純化抗體傳統(tǒng)的方法之一,被廣泛用于血清和腹水抗體的濃縮和粗純,此方法可大規(guī)模粗純抗體,但純化后純度不高,還需配合其它方法繼續(xù)純化。通常是將飽和硫酸加入血清或腹水中,將抗體沉淀下來(lái),然后在溶解沉淀繼續(xù)下一步的純化。辛酸沉淀抗體通常要先將腹水或血清的pH調(diào)4.8,然后緩慢的滴加辛酸,是蛋白沉淀,抗體在上清中,上清繼續(xù)下一步的純化。
  2、離子交換層析:
  離子交換層析也常用于抗體的純化,通量大,工業(yè)上用離子交換層析成本低,主要用于除去非抗體蛋白,及用親和層析純化時(shí)混入的ProteinA/G等親和填料脫離的配基,內(nèi)毒素的去除等。離子交換純化時(shí),根據(jù)抗體的pI選擇合適的離子交換類(lèi)型,在pI未知時(shí)可以分別用陰陽(yáng)離子交換填料去試驗(yàn)。

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