詳細介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | DMEM 培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 500ml |
英文名稱 | DMEM Medium ,DMEM培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3090 |
MEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(4500mg/L)和低糖型(1000mg/L)。
DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫,所以其特點主要包括以下:
(1)氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍,且含有非必需氨基酸,如等;
(2)維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍;
(3)含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)——丙酮酸;
(4)含有微量的鐵離子。
注意事項:
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
細胞實驗步驟:
一、細胞復(fù)蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min;
2.預(yù)熱培養(yǎng)基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi),補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人低分化肺腺癌細胞SK-LU-1(STR鑒定正確) | 病毒沉淀劑 |
人淋巴母細胞T2(174×CEM.T2)(STR鑒定正確) | 非凍型拭子病毒保存液 |
人小細胞肺癌細胞SHP-77 (STR鑒定正確) | 血清血漿尿液游離RNA提取試劑 |
人小細胞肺癌NCI-H526(STR鑒定正確) | 植物RNA提取試劑盒(含DNase I) |
小鼠急性骨髓性白血病綠色標記C1498-GFP | 細菌RNA提取試劑盒(含DNase I) |
小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系STC-1 (種屬鑒定) | 動物組織/細胞RNA提取試劑盒(含DNase I) |
人腦膜瘤細胞IOMM-Lee (STR鑒定正確) | 血液RNA提取試劑盒(含DNase I) |
人少突膠質(zhì)細胞MO3.13(STR鑒定正確) | 固定組織RNA提取試劑盒 |
人胃癌細胞帶熒光素酶MKN-45+LUC(STR鑒定正確) | miRNA提取試劑盒 |
魚鰓細胞系 RTgill-W1 (ATCC CRL-2523) | 病毒RNA提取試劑盒 |
人肝星形細胞帶紅色熒光LX-2+RFP(STR鑒定正確) | 超純RNA提取試劑盒(DNase I) |
人神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌細胞NCI-H660 | 超純RNA提取試劑盒 |
人正常卵巢上皮細胞 IOSE-80(STR鑒定正確) | TRIzon試劑(總RNA提取) |
小鼠骨肉瘤成骨細胞帶熒光素酶K7M2 wt +LUC (種屬鑒定) | 總RNA抽提試劑(Trizol法) |
小鼠肺癌細胞紅色熒光LLC+RFP(種屬鑒定) | 酸酚 |
人骨肉瘤細胞帶熒光素酶143B+LUC(STR鑒定正確) | 超純水 |
小鼠肺泡上皮細胞 MLE-12(種屬鑒定) | TRIzol試劑伴侶 |
人小細胞肺癌細胞NCI-H82(STR鑒定正確) | RNA洗脫液 |
大鼠空腸膠質(zhì)細胞EGC CRL-2690(種屬鑒定) | RNAse-free水 |
人乳腺腺癌細胞帶熒光素酶SK-BR-3+LUC(STR鑒定) | DEPC處理水 |
人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞LN-18(STR鑒定正確) | DMEM 培養(yǎng)基柱式DNA清除劑 |
人骨肉瘤細胞HOS(STR鑒定正確) | DNase溶液(無RNase活性) |
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復(fù)蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復(fù)幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉(zhuǎn)移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。