详细介绍
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏佐剂和弗氏不佐剂
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,产品仅用于科研是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质保障,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
TMEM132A抗体 | TMEM132A | GOY-01K0624 |
商品介绍:
规格:50ul 100ul 200ul 产品分类:抗体 / 一抗 中文名称 跨膜蛋白132A抗体 英文别名 GBP; HSPA5-binding protein 1; HSPA5BP1; T132A_HUMAN; Tmem132a; Transmembrane protein 132A. 交叉反应:Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep 标记: Unconjugated 抗体来源: Rabbit 抗体类型: Polyclonal 免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TMEM132A 蛋白细胞定位: 细胞浆,细胞膜 纯化方法: affinity purified by Protein A 亚型 IgG 性状: Liquid 浓度: 1mg/ml 储存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. 保存条件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. 研究领域: 神经生物学 细胞凋亡 细胞膜蛋白 背景资料: TMEM132A is a 560 amino acid protein encoded by a e mapping to human chromosome 11. With approximately 135 million base pairs and 1,400 es, chromosome 11 makes up around 4% of human omic DNA and is considered a e and disease association dense chromosome. The chromosome 11 encoded Atm e is important for regulation of cell cycle arrest and apoptosis following double strand DNA breaks. Atm mutation leads to the disorder known as ataxia-telangiectasia. The blood disorders Sickle cell anemia and ∫ thalassemia are caused by HBB e mutations. Wilms' tumors, WAGR syndrome and Denys-Drash syndrome are associated with mutations of the WT1 e. Jervell and Lange-Nielsen syndrome, Jacobsen syndrome, Niemann-Pick disease, hereditary angioedema and Smith-Lemli-Opitz syndrome are also associated with defects in chromosome 11. |
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实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用??固蹇杀恢行匝卫喑恋?。在上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
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抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力??固宓奶匾煨愿?它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol??固迩缀土Φ牟舛ǘ钥固宓纳秆?确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。