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NO含量测试盒微量法

本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
商品属性：

测定意义：

NO（Nitric Oxide，NO）广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中，特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质，发挥信号传递的作用，是一种新型的生物信使分子，在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理：
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—，在酸性条件下，NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响，每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存。（用之前震荡溶解后使用）

试剂二：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存。(用之前 60℃加热震荡 15min)

样品处理：

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，

加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆。10000g，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10

4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 15min，取上清置于冰上待测。

3. 体液和培养液等其它液态样品：直接测定。

订购流程:

1、订购前,请与销售员核对产品中文名称/CAS号/英文名称等。

2、我司大部分产品都是现货,产品核实好下单后即可当天发货。(库存信息以当日为准)如有特殊要求请在发货前与销售员联系。

3、我司产品支持款到发货、快递代收尾款、网上现拍等付款方式。

4、质量保证,严格把关,如有产品异议经公司鉴定确认后可包换包退,免除客户后顾之忧。

5、我司提供完善的售后服务,使用过程中如有任何疑问,可提供技术指导。

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 550nm。

2、操作表

空白管 测定管

样品（μL） 100

提取液（μL） 100

试剂一（μL） 50 50

试剂二（μL） 50 50

混匀，室温静置 15min，于微量石英比色皿/96 孔板，测定 A550，ΔA=A 测定-A 空白

NO 含量计算：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为：y= 0.016x -0.0103，R2= 0. 9986

1、组织样品：

（1）按样本质量计算

NO 含量（μmoL/g 鲜重）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）×10

-3 = 0.125×（ΔA +0.0103）÷W

（2）按样本蛋白浓度计算

NO 含量（μmoL/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反总÷（V 样×Cpr）×10

-3 = 0.125×（ΔA +0.0103）÷Cpr

2、细胞：

NO 含量（μmol/10

4 cell）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量）×10-3 = 0.125×（ΔA +0.0103）÷细胞数量（万个）

3、其他样品：

NO 含量（μmoL/L）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反总÷V 样= 125×（ΔA +0.0103）

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样品体积，0.1mL；V 样总：加入提取液体积，

1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为：y= 0.008x - 0.0103，R2= 0. 9986

1、组织样品：

（1）按样本重量计算

NO 含量（μmoL/g 鲜重）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）×10

-3 = 0.25×（ΔA +0.0103）÷W

（2）按样本蛋白浓度计算

NO 含量（μmoL/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V 反总÷（V 样×Cpr）×10

-3 = 0.25×（ΔA +0.0103）÷ Cpr

2、细胞：

NO 含量（μmol/10

4 cell）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量）×10

-3 = 0.25×（ΔA +0.0103）÷细胞数量（万个）

3、 其他样品：

NO 含量（μmoL/L）=（ΔA +0.0103）÷0.008× V 反总÷V 样= 250×（ΔA +0.0103）

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样品体积，0.1mL；V 样总：加入提取液体积，

1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL

生化试剂盒的使用注意事项：

选择合适的试剂盒：根据实验目的和检测对象选择合适的试剂盒，确保实验的准确性和可靠性。

严格遵循说明书：按照试剂盒的说明书进行操作，避免误用或浪费。

注意保存条件：按照试剂盒的保存条件进行妥善保存，避免阳光直射、高温或潮湿等不利因素。

控制实验条件：在实验过程中严格控制实验条件，如温度、时间、pH值等，以确保实验结果的稳定性。

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