禽流感病毒H9亚型（AIV-H9）核酸检测试剂盒样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

普通PCR反应流程：

使用及效果：

将压碎的一小片重量约在100mg左右的植物种子（约1/4黄豆大?。┗蛑本对嘉?.5-0.7cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1mL溶液A中，95℃保温10-15分钟，加入0.1mL溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。

自备物品：

15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶标板：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

酶标仪：用于微量样品比色分析

储存条件：

14℃或-20℃

准备物品

清理液（A）毫升

染色液（t B）微升

稀释液（C）毫升

溶解液（tD）毫升

产品说明书1份

反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度：15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度：以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

2-氯-1,10-菲咯啉分子式：214.65分子量： C12H7ClN2英文名称：2- Cl -1,10-CAS号：7089-68-1

3,5-二溴氟分子式：253.89分子量： C6H3Br2F英文名称：3,5- dibromo fluoroCAS号：1435-51-4

紅色37;C.I.17045英文名称：3717045 acid red C.I.CAS号：302912-22-7分子式：524.441分子量： C18H14N4O8S2.2Na

1-(甲酰甲)氯吡分子式：172.61分子量： C7H9ClN2O英文名称：1- (Xian Jiaji An Jijia)CAS号：41220-29-5

1,3-二甲-5-分子式：232.06分子量： C8H9I英文名称：1,3- two -5- methyl iodophenylCAS号：22445-41-6

4-溴-5--1H-1,2,3-三唑分子式：224分子量： C8H6BrN3英文名称：4- -5- threeCAS号：21505-14-6

性藏蓝R英文名称：Acid Navy RCAS号：3861-73-2分子式：695.58分子量： C26H16N3Na3O10S3

松脂二葡萄糖苷英文名称：Two pinoresinol glucosideCAS号：63902-38-5分子式：682.66628分子量：C32H42O16

二氢醉椒素英文名称：Two hydrogen drunkCAS号：587-63-3分子式：232.27504分子量：C14H16O3

2-溴-5-氯氟分子式：209.44分子量： C6H3BrClF英文名称：2- bromo -5- chlorofluorobenzeneCAS号：1996-29-8

Goat Anti-rat IgG/Cy3  Cy3标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml

phospho-Tau protein(Ser422)  磷酸化微管相关蛋白抗体 0.1ml

PDLIM1  细胞骨架蛋白C端PDLIM1抗体 0.2ml

RASSF2  Ras相关结构域蛋白质2抗体 0.2ml

phospho-SYN1(Ser549)  磷酸化神经突触素1抗体 0.1ml

Annexin I  膜粘连蛋白 I抗体 0.1ml

phospho-Dnmt1(Tyr399)  磷酸化DNA甲基转移酶1抗体 0.1ml

CNKSR1  Ras激酶抑制因子连接增强蛋白1抗体 0.2ml

CD226/DNAM-1  CD226抗体 0.1ml

STAT5b  信号转导和转录激活因子5b抗体 0.2ml

TSPAN9/NET-5  四分子交联体9/四旋蛋白抗体 0.2ml