详细介绍
细胞实验步骤:
一、细胞复苏
1.将10ml移液管、移液枪、1ml枪头、50ml离心管、T25培养瓶、酒精灯、废液缸等物品放入超净工作台,紫外灯照射30min后再通风30min;
2.预热培养基;
3.用75%酒精消毒后放入超净工作台;
4.将冻存细胞从液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴锅中快速晃动使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超净工作台;
7.吸取9ml培养基到50ml离心管中;
8.用1ml枪头吸取解冻的细胞悬液于离心管中;
9.1000r/min,离心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超净工作台;
11.吸弃上清液;
12.吸取1ml培养基重悬细胞,将细胞悬液转移到培养瓶内,补加适量培养基,轻轻晃动培养瓶使细胞分布均匀,并做好标记;
13.在显微镜下观察复苏的细胞密度及状态;
14.将细胞放回二氧化碳培养箱中静置培养。
商品属性:
产品名称 | 大鼠原代视网膜色素上皮细胞专用培养基 | 规格 | 100mL/500mL |
产品分类 | 原代细胞专用培养基 | 货号 | GOY-XP3610 |
鼠原代视网膜色素上皮细胞培养基由团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持大鼠原代视网膜色素上皮细胞优良的生长状态。
本产品中已包含大鼠原代视网膜色素上皮细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于大鼠原代视网膜色素上皮细胞的培养。
名称 | 体积 | 浓度 | 保存条件 |
原代上皮细胞基础培养基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮细胞培养添加剂 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 终浓度10% | -20℃、避光 |
注意事项:
仅限科研用。
培养体系中的一些组分是对人体健康有害的物质,请不要用暴露的皮肤接触培养体系的液体和有培养体系的液体残留的容器内部;这部分有害物质的浓度和危害性都较低,如有接触,立即用自来水冲洗即可。
公司正在出售的产品:
神经束蛋白(NFASC)重组蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC)
IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白
CSF3重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 标签) Protein
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
ARF1重组人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein
大鼠巨噬细胞性蛋白5(MIP5)试剂盒 ,英文名: MIP5 ELISA Kit
Monkey acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit乙酰受体抗体(AChRab)试剂盒
RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 大鼠颗粒酶A(Gzms-A)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFRA(Humanfibronectioelatedaigen)ELISAKit人纤维连接素相关抗原
细胞肌酸激酶(CK)活性酶动力比色法定量试剂盒25次
RatPhosphorylatedacetyl-CoAcatboxylase,pACCaseELISAKit大鼠0酸化乙酰羧化酶(pACCase)试剂盒规格:96T/48T
生化试剂盒
谷酰胺测试盒 Glamine test kit
谷酸测试盒 Glamate test kit
谷酰胺、谷酸(两种均可测) Glamine and glamic acid (two can be measured)
豚鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RAES)试剂盒 ,英文名: RAES ELISA Kit
Human secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) ELISA Kit 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)试剂盒
rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 兔子巨噬细胞性蛋白5(MIP-5)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBCDF(HumanBcelldifferetiationfactor)ELISAKit人B细胞分化因子
纤维素分解活力(FIBRINOLYTIC)试剂盒20次
RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit兔子胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒规格:96T/48T
丙酮酸脱氢酶E2抗体
球蛋白样结构域受体1抗体
大鼠原代视网膜色素上皮细胞专用培养基CSF3重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 标签) Protein
神经束蛋白(NFASC)重组蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC)
ARF1重组人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein
IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
细胞培养步骤:
?细胞复苏?:
从液氮罐中取出冻存细胞,迅速放入37℃水浴中解冻。
解冻后,将细胞转移到含有新鲜培养基的培养皿中,轻轻摇动使细胞均匀分布。
放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
?细胞换液?:
吸除或倒掉培养皿内的旧培养液。
加入PBS缓冲液,轻轻漂洗细胞,以去除悬浮在细胞表面的碎片,重复几次。
加入新的培养基。
?细胞传代?:
当细胞长到80%~90%时,进行传代。
吸除或倒掉瓶内旧培养液,加入PBS缓冲液漂洗。
加入消化液,轻轻摇动使消化液流遍所有细胞表面。
将培养瓶放入37℃培养箱中静止几分钟,观察细胞变化。当细胞间隙增大后,加入含有血清的培养液终止消化。
吹打细胞使其成为悬液,转移到离心管中离心。
弃上清,加入适量的细胞培养液重悬细胞。
按比例分装到新的培养皿中,补加新鲜培养基。
做好标记,放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
?细胞冻存?:
选择对数生长期的细胞进行冻存。
将细胞转移到离心管中离心,弃上清。
加入适量的冻存液(如90%的培养基+10%的DMSO),轻轻吹打重悬细胞。
将细胞转移到冷冻保存管中,标记后放入程序降温盒,再放入-80℃冰箱冻存。几小时后或过夜转至液氮罐保存。