詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內,補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性:
產品名稱 | 兔原代輸尿管上皮細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3723 |
兔原代輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持兔原代輸尿管上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含兔原代輸尿管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代輸尿管上皮細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項:
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
公司正在出售的產品:
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽 0.5mghistone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽
BPIFA2 Protein Human 重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (His 標簽)
FCGR3A重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽) Protein
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His 標簽)
FABP1重組人 L-FABP / FABP1 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠骨膠原交聯(Cr)試劑盒 ,英文名: Cr ELISA Kit
Rabbit ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 兔子α干擾素(IFN-α)試劑盒
伯氏疏(BB)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-1(Rabbitmaixmetalloproteinase1)ELISAKit兔基質金屬蛋白酶1
體液基質金屬蛋白酶(MMP-9)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitTn-Ⅰ犬肌鈣蛋白Ⅰ
轉氫酶-1試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
轉氫酶-2試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
檸檬酸(CA)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
豬胰島素樣生長因子結合蛋白Ⅱ(IGFBP-Ⅱ)試劑盒
Human cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 人環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒
RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAP12(Mouseapelin12)ELISAKit小鼠apelin12
血清樣品樹脂法去內毒素試劑盒20次
Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit豬白介素17(IL-17)試劑盒
丙酮酸脫氫酶α1抗體
粘蛋白-1單克隆抗體
兔原代輸尿管上皮細胞專用培養(yǎng)基FCGR3A重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽) Protein
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽 0.5mghistone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽
FABP1重組人 L-FABP / FABP1 蛋白 (His 標簽) Protein
BPIFA2 Protein Human 重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (His 標簽)
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His 標簽)
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。