小鼠原代胰島細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL 家貓肺細(xì)胞;FCA-L2 OCM-1A細(xì)胞，人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞 綠色木霉 人原代子宮內(nèi)膜干細(xì)胞培養(yǎng)基 小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠原代胰島細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代胰島細(xì)胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代胰島細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代胰島細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代胰島細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測。

Pentapeptide-3/Leuphasyl 五勝肽 1gPentapeptide-3/Leuphasyl 五勝肽

CD177 Protein Human 重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PECAM1 Protein Human 重組人 CD31 / PECAM1 蛋白

SULT2B1重組人 SULT2B1 / HSST2 蛋白 Protein

大鼠谷酸脫氫酶(GDH/GLDH)試劑盒 ，英文名： GDH/GLDH ELISA Kit

Porcine ierleukin 1 (IL-1) ELISA Kit 豬白介素1(IL-1)試劑盒

單增李斯特菌(LM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIF(HumanMacrophageMigrationInhibitoryFactor)ELISAKit人巨噬細(xì)胞移動抑制因子

體液亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIGF-1牛胰島素樣生長因子1

心肌營養(yǎng)素1   英文名稱：   Cardioophin-1   規(guī)格：      英文縮寫：   CT-1

半胱天冬蛋白酶-1   英文名稱：   cysteine-aspaic acid protease-1   規(guī)格：      英文縮寫：   Caspase-1

半胱天冬蛋白酶-2   英文名稱：   cysteine-aspaic acid protease-2   規(guī)格：      英文縮寫：   Caspase-2

半胱天冬蛋白酶-3   英文名稱：   cysteine-aspaic acid protease-3   規(guī)格：      英文縮寫：   Caspase-3

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cytokine receptor (sCKR) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)試劑盒

HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit 人鳥脫羧酶(ODC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Mouse25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit小鼠25羥基3

飲料比色法定量試劑盒20次

MouseL-phenylalanine,LPAELISAKit小鼠苯(LPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

AF680標(biāo)記的環(huán)氧合酶2/前列腺素內(nèi)過氧化物合成酶2抗體

轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體

小鼠原代胰島細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

Pentapeptide-3/Leuphasyl 五勝肽 1gPentapeptide-3/Leuphasyl 五勝肽

SULT2B1重組人 SULT2B1 / HSST2 蛋白 Protein

CD177 Protein Human 重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白

PECAM1 Protein Human 重組人 CD31 / PECAM1 蛋白