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技術(shù)文章

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒測定抗原中試劑的優(yōu)劣勢

閱讀:694          發(fā)布時間:2018-9-11

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:

(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);

(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);

(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不類型的檢測方法。

     直接法(direct elisa)將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。
缺點(diǎn):交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。
間接法(indirect elisa)

ELISA試劑盒可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類為以下兩種方法。

    此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
缺點(diǎn):試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費(fèi)用相對提高。

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