細胞作為生命體結構與功能的最小獨立單元，始終是生命科學研究的基石，在探索生命奧秘的征程中占據核心地位： 1、科研領域：細胞的增殖分化、信號傳導、代謝調控等動態(tài)過程，為解析生理機制與疾病發(fā)生提供關鍵靶點，是揭秘生命進程的核心工具； 2、藥物研發(fā)：細胞模型是高通量篩選、毒性評估及藥效驗證的核心載體，從早期化合物篩選到臨床前研究，細胞活性檢測貫穿全程。隨著基因編輯（如 CRISPR）及細胞治療技術的革新，細胞更成為攻克疾病的前沿 “藥物"； 3、生產領域：細胞化身微型生物工廠，為科研工作者高效產出抗體、蛋白、多肽等科研試劑與藥物，驅動生命科學研究與產業(yè)轉化。
“我培養(yǎng)的細胞生長狀況如何？"，這是在實驗中當細胞暴露于某種物質或影響因素下，科研工作者要問的首要問題。這個問題可以通過對多種指征細胞活性的指標進行檢測來回答，接下來小編將帶大家全面了解檢測細胞活性的三大類（共六種）方法，助力大家更好的選擇合適的方法，快速搞定細胞活力檢測。
1.明星方法，基于檢測細胞中ATP含量的方式測定細胞活性
細胞內ATP（腺苷三磷酸）的含量是細胞能量代謝的直接指標。ATP生物發(fā)光法通過測量細胞內ATP的水平來評估細胞活性。這種方法操作簡便，整個方案簡化成“加入-孵育-讀取"三步驟，并且具有高靈敏度和寬動態(tài)范圍的特點，尤其適合于需要高通量，且需要高靈敏度檢測的實驗。 
熒光素酶法檢測細胞活性原理圖
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 | abs50065 | 2D Luminescent Cell Viability Assay Kit | 100 & 1000 ml | 基礎款 | abs50059 | 2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit | 10 & 100 ml | 針對類器官優(yōu)化 | abs50192 | CTG-LTM 2D細胞活力檢測試劑盒 | 10 & 100 ml | 信號更強 | abs50190 | CTG-LTM 3D細胞活力檢測試劑盒 | 10 & 100 ml | 針對類器官優(yōu)化 | abs50189 | CTG-LTM 2D細胞活力檢測試劑盒2.0 | 100 & 500 ml | 更穩(wěn)定 |
2.可與CTG-L試劑聯(lián)用，基于活細胞蛋白酶活性，非裂解熒光法測定細胞活性
對于細胞活性檢測，有時需要有內參對照，由此產生 multiplex 分析需求，即對同一樣本進行多種分析方法同時檢測，且要求分析檢測方法相互不干擾，彼此檢測機理不同，如此可以進行相關對比，從而排除實驗因素外的數據差異。本試劑檢測原理是檢測活細胞內一種保守蛋白酶，活性僅與完好的活細胞有關。可穿透細胞膜的活性底物進入活細胞后，被活細胞蛋白酶切割，產生熒光信號，信號的強度與活細胞數量呈正比。當細胞膜的完整性喪失，并漏出到周圍培養(yǎng)基后，該活細胞蛋白酶的活性會由于環(huán)境與細胞內環(huán)境不同而消失。本試劑與CTG-L系列熒光素酶試劑盒檢測原理不同，檢測方法也不同，可以檢測到更早期的輕微的細胞損害，兩個檢測試劑相容性好，可以進行 multiplex 檢測。此方法操作步驟簡單，“加入-孵育-讀取"三步驟即可完成實驗，適合高通量檢測。 
活細胞蛋白酶活性檢測原題圖
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 | abs50193 | CTF-LTM 2D熒光細胞活力檢測試劑盒 | 10 & 50×2 ml | Ex380/Em510，熒光法，非裂解 |
3.傳統(tǒng)經典方法，基于線粒體脫氫酶還原性，測定細胞活性
基于線粒體脫氫酶活性的細胞活性檢測方法，其機制主要依賴于線粒體脫氫酶在細胞代謝過程中的關鍵作用。這種酶位于線粒體內膜，能夠催化底物（通常是涉及氧化還原反應的化合物）的脫氫過程，將電子轉移給特定的電子受體（如MTT試劑中的顯色底物）。
當細胞具有活性時，線粒體功能正常，脫氫酶活性較高，能夠高效地將底物還原，使底物發(fā)生顏色變化（如MTT被還原為紫色結晶甲瓚）。而當細胞失去活性或活性降低時，線粒體功能受損，脫氫酶活性下降，底物還原反應程度減弱，顏色變化程度也隨之降低。
由于檢測底物不同，此類方法又可細分為:
①MTT法：使用前需兩種組分預混，工作液可被線粒體脫氫酶催化產生不容易水的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)，需換液溶解產物，測定570 nm吸光度；
②MTS法，MTT升級產品，使用前需兩種組分預混，工作液可被線粒體脫氫酶催化產生溶于水的甲瓚(Formazan)產物，無需更換溶液，更簡便，需測定490 nm吸光度；
③CCK-8法，MTT升級產品，可以直接加入到細胞樣品中,不需要預配各種成分，檢測快速，毒性非常低，其有效底物WST-8在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜染料，無需更換溶液，更簡便，需測定450 nm吸光度。
④阿爾瑪藍（Alamar Blue）法，主要成分為刃天青（resazurin），是一種細胞膜滲透性、無毒性且弱藍色熒光的指示劑，做為MTT的替代物，氧化態(tài)的刃天青呈紫藍色且基本無熒光，其還原態(tài)產物試鹵靈（resorufin）轉變?yōu)榉奂t色且高度熒光，產生的熒光強度與呼吸活細胞數量呈正比。阿爾瑪藍的顏色變化可通過普通分光光度計檢測吸光度變化，檢測波長為570 nm，參考波長為600 nm；阿爾瑪藍的熒光變化可通過熒光光度計檢測，激發(fā)波長在530~560 nm之間，發(fā)射波長為590 nm。 
基于線粒體脫氫酶活性檢測細胞活性原理圖
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 | abs50010 | MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 | 500 T | 需預混，需換液 | abs50011 | 細胞增殖檢測試劑盒（MTS） | 500 & 2500 T | 需預混，無需換液 | abs50003 | CCK-8試劑盒 | 500 & 5000 T | 無需預混及換液 | abs47047610 | Alamar Blue 阿爾瑪藍細胞增殖及毒性檢測試劑 | 500 & 1000 & 5000 T | 無需預混及換液，可吸光可熒光 |
以上三類就是目前檢測細胞活性的主要方法，小編也在這里匯總了這些方法的特點，更方便大家根據實際需求去選擇。
方法 | 貨號 | 品名 | 產品特點 | 信號半衰期 | 方法特點 | 通量 | 靈敏度 | 檢測所需時間 | ATP法檢測 | abs50065 | 2D Luminescent Cell Viability Assay Kit | 初代CTG產品，快速，高效 | 生物發(fā)光 ＞0.5h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 100個細胞 | 10 min | abs50059 | 2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit | 初代CTG產品，3D類器官優(yōu)化 | 生物發(fā)光 ＞0.5h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 100個細胞 | 30 min | abs50192 | CTG-LTM 2D細胞活力檢測試劑盒 | 升級款CTG，信號更強，窗口更大 | 生物發(fā)光 ＞1h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 50個細胞 | 10 min | abs50190 | CTG-LTM 3D細胞活力檢測試劑盒 | 升級款CTG，3D類器官優(yōu)化 | 生物發(fā)光 ＞1h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 50個細胞 | 30 min | abs50189 | CTG-LTM 2D細胞活力檢測試劑盒2.0 | 升級款CTG，穩(wěn)定性更強 | 生物發(fā)光 ＞2h (2-4h) | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 50個細胞 | 10 min | 活細胞蛋白酶 | abs50193 | CTF-LTM 2D熒光細胞活力檢測試劑盒 | 熒光檢測，可以與CTG系列產品進行multiplex聯(lián)合分析 | 熒光， Ex: 380nm Em: 510nm | 非裂解 可伴隨檢測 | 96/384 | 100個細胞 | 0.5-3h | 線粒體脫氫酶 | abs50010 | MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 | 經典方法，需換液，加入溶劑溶解后測定； | 吸光度， OD570 nm | 非裂解 需換液，有損失風險 | 96 | 1000個細胞 | 4h | abs50011 | 細胞增殖檢測試劑盒（MTS） | MTT升級方法，無需換液，可伴隨檢測 | 吸光度， OD490 nm | 非裂解 可伴隨檢測 | 96/384 | 500個細胞 | 1-4h | abs50003 | CCK-8試劑盒 | MTT升級方法，無需換液，可伴隨檢測，靈敏度更高 | 吸光度， OD450 nm | 非裂解 可伴隨檢測 | 96/384 | 200個細胞 | 1-4h | abs47047610 | Alamar Blue 阿爾瑪藍細胞增殖及毒性檢測試劑 | MTT升級方法，無需換液，可伴隨檢測，可選擇吸光度檢測，也可選擇熒光檢測 | 吸光度， OD570 nm 熒光， Ex: 560nm Em: 590nm | 非裂解 可伴隨檢測，可熒光，可吸光 | 96/384 | 100個細胞 | 1-4h |
今天的講解就到這里，后續(xù)還會有細胞凋亡和毒性的檢測方法匯總，敬請期待~
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