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說(shuō)一說(shuō)解離液在細(xì)胞分離中的作用

閱讀:3801      發(fā)布時(shí)間:2022-7-22
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  組織解離液是由多種生物酶組成的混合物,可溫和、快速、高效地將組織中的結(jié)締組織酶解并釋放出細(xì)胞,形成細(xì)胞懸液。組織解離液適用于脾臟、肝臟、腎臟、胰腺、胃黏膜組織、膽囊、腫瘤組織等多種組織的細(xì)胞分離。解離組織獲得的細(xì)胞具有高活性,可保留細(xì)胞的表面抗原等特點(diǎn),細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞分選、藥物篩選、單細(xì)胞測(cè)序等。
  解離液常用于根尖等細(xì)胞的涂片,它能使細(xì)胞壁中層(果膠質(zhì))溶解,而使細(xì)胞分開(kāi)。
  解離就是用要藥液使組織的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái),便于最后制片時(shí)能被壓成一薄層進(jìn)行顯微觀察。解離液中酒精的作用是迅速殺死細(xì)胞,固定細(xì)胞的分裂相(將洋蔥根尖剪下后,如果不立即投入固定液中將其殺死并令其各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)凝固,那么,整個(gè)根尖將一個(gè)分裂期細(xì)胞也找不到?。欢}酸能溶解果膠,從而使洋蔥細(xì)胞的細(xì)胞壁軟化,并使細(xì)胞間的中膠層物質(zhì)溶解,從而達(dá)到分離細(xì)胞的目的。另外解離時(shí)間不宜過(guò)短,否則根尖未充分解離,壓片時(shí)細(xì)胞分不開(kāi);但又不能太長(zhǎng),否則使根尖過(guò)分酥軟,無(wú)法進(jìn)行漂洗和染色,且染色體成分被破壞。這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵。
  漂洗的目的是去除根中多余的解離液,特別是鹽酸,防止解離過(guò)度,破壞染色體結(jié)構(gòu)。(注:不是因?yàn)槿旧珪r(shí)用的是堿性染料龍膽紫,酸與堿發(fā)生反應(yīng)會(huì)影響染色效果,龍膽紫溶液呈酸性,而堿性染料是根據(jù)染料物質(zhì)中助色基團(tuán)電離后所帶的電荷來(lái)決定。一般來(lái)說(shuō),助色基團(tuán)帶正電荷的染色劑為堿性染色劑,反之則為酸性染色劑。)

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