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有必要對血清進(jìn)行熱滅活嗎?

閱讀:2149      發(fā)布時間:2020-6-22
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  血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價格不菲的血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長達(dá)30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實驗室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,多數(shù)實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響,下面我們就對胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。
  清熱滅活操作步驟:
 ?、龠x用與血清瓶同規(guī)格的對照瓶一個。
  ②對照瓶內(nèi)放入與血清等體積的水。
  ③溫度預(yù)試。對照瓶內(nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(保證測試溫度的準(zhǔn)確性),放入水浴箱中,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
 ?、苎鍦缁?。血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時,定時30分鐘。
 ?、荽笃垦鍦缁詈?,進(jìn)行分裝。
 ?、薇4妗7盅b后,抽樣做無菌試驗,-20~-70℃保存。
  多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細(xì)胞的生長,卻降低了支持細(xì)胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對于那些對血清進(jìn)行滅活的用戶,需要通過試驗來證實其必要性,確定滅活的適當(dāng)條件;在滅活過程中,需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測,并選擇一個可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。
  

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