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ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題

閱讀:2456      發(fā)布時(shí)間:2019-10-30
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問(wèn)題原因   方法
白色條帶黑色背景體系中HRP過(guò)量   進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記
膜上有棕色或黃色條帶
背景發(fā)亮
信號(hào)弱或無(wú)信號(hào)HRP過(guò)量,消耗底物   進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記
抗原或抗體不足   增加抗體
   使用超級(jí)ECL
轉(zhuǎn)膜失敗   優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件
HRP 活性低   測(cè)試HRP 活性:暗室中,將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質(zhì)工作
   溶液的試管中。 幾分鐘內(nèi),溶液會(huì)立即發(fā)出藍(lán)光。
高背景HRP過(guò)量,消耗底物   進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記
封閉不充分或使用了不適當(dāng)?shù)姆忾]試劑   優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件
洗滌不充分   增加洗滌時(shí)間和次數(shù)
膜過(guò)度曝光   減少曝光時(shí)間
抗原、抗體 過(guò)量   減少抗體上樣量
抗體特異性差   優(yōu)化抗體特異性
條帶有斑點(diǎn)轉(zhuǎn)膜失敗   優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件
x射線膠片與膜之間有氣泡   去除所有氣泡后,再曝光到膠片上
背景有斑點(diǎn)形成聚合體   使用前通過(guò)0.2um過(guò)濾器過(guò)濾hrp -偶聯(lián)物
電泳轉(zhuǎn)移過(guò)程中溫度過(guò)高   控制電泳和轉(zhuǎn)移過(guò)程中的溫度
非特異性條帶HRP-偶聯(lián)物過(guò)量   進(jìn)一步稀釋hrp -偶聯(lián)物
SDS導(dǎo)致非特異性蛋白結(jié)合   在免疫檢測(cè)過(guò)程中不要使用SDS
抗體特異性差   優(yōu)化抗體特異性

 

愛(ài)必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):
二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動(dòng)植物提取物,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...

 

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