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細(xì)胞培養(yǎng)過程中的支原體污染：來源、影響及預(yù)防措施

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，支原體污染是一種常見的污染現(xiàn)象。支原體是一種介于細(xì)菌和病毒之間的微生物，它們具有高度的適應(yīng)性和生存能力，能夠在多種環(huán)境中存活并繁殖。因此，細(xì)胞培養(yǎng)過程中支原體污染的來源多種多樣，對(duì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生不良影響，需要采取有效的預(yù)防措施。

支原體污染的來源主要包括以下幾個(gè)方面：

1、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中可能存在支原體污染源，如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。2、實(shí)驗(yàn)操作人員的手部、衣物以及實(shí)驗(yàn)器材等都可能成為支原體污染的媒介。

3、細(xì)胞培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料也可能受到支原體的污染。

支原體污染對(duì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的不良影響主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

1、支原體污染會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、形態(tài)改變，甚至引起細(xì)胞死亡，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

2、支原體污染還可能干擾細(xì)胞的代謝過程，影響細(xì)胞的功能和表達(dá)，從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和解讀。

3、此外，支原體還可能作為外源性因素，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生潛在的干擾，使研究者難以區(qū)分細(xì)胞的內(nèi)在變化與外界因素的影響。

為了避免支原體污染，我們可以采取以下預(yù)防措施：

1、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒工作，定期清潔實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、實(shí)驗(yàn)器材以及培養(yǎng)箱等設(shè)備，減少支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)。使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體祛除試劑：Mycoplasma Off對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔。

2、實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)范，穿戴專用的實(shí)驗(yàn)服和手套，避免直接接觸細(xì)胞培養(yǎng)物。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)定期接受培訓(xùn)，提高實(shí)驗(yàn)技能和操作水平，減少操作過程中的污染風(fēng)險(xiǎn)。

3、選擇質(zhì)量可靠的培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料，避免使用來源不明的培養(yǎng)材料，降低支原體污染的可能性。Ausbian進(jìn)口胎牛血清，經(jīng)過7次無菌過濾，最后3次為3微米濾膜過濾，清除潛在的支原體污染。

除了上述預(yù)防措施外，我們還可以通過定期檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物中的支原體污染情況來及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理污染問題。常用的檢測(cè)方法包括PCR檢測(cè)、支原體特異性抗體檢測(cè)等。一旦發(fā)現(xiàn)支原體污染，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)，對(duì)污染細(xì)胞進(jìn)行清理和消毒，并對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行重新評(píng)估和調(diào)整，以防止污染的擴(kuò)散和再次發(fā)生。