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資源名稱 SK-N-BE(2)使用說(shuō)明書
種屬  人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

類型  腦,神經(jīng)母細(xì)胞瘤,骨髓轉(zhuǎn)移灶

形態(tài)  神經(jīng)母細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，45%；F-12培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)21700075，添加L-glutamine 300mg/L, NaHCO3 1.5g/L)，45%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)

詳細(xì)說(shuō)明

動(dòng)物種別  人

性別  男

描述  1972年11月從一們多次化療及放療的擴(kuò)散性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株。 該細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 有報(bào)道稱SK-N-BE(2)細(xì)胞的飽和濃度超過1x106細(xì)胞/平方厘米。細(xì)胞形態(tài)多樣，有的有長(zhǎng)突觸，有的呈上皮細(xì)胞樣。 細(xì)胞會(huì)聚集，形成團(tuán)塊并浮起。 在本庫(kù)通過支原體檢測(cè)。 在本庫(kù)通過STR檢測(cè)。

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
SK-N-BE(2)使用說(shuō)明書操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
SK-N-BE(2)使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。70908-100 DNA PAGE 膠回收試劑盒 100 次
70908-100 DNA PAGE 膠回收試劑盒 100 次
70908-100 DNA PAGE 膠回收試劑盒 100 次
70907-100 去離子甲酰胺 100mL
70907-100 去離子甲酰胺 100mL
70907-100 去離子甲酰胺 100mL
70906-0.5 NTP 溶液，10mM 0.5mL
70906-0.5 NTP 溶液，10mM 0.5mL
70906-0.5 NTP 溶液，10mM 0.5mL
70905-1.5 明膠溶液，2%，PCR 級(jí) 1.5mL
70905-1.5 明膠溶液，2%，PCR 級(jí) 1.5mL
70905-1.5 明膠溶液，2%，PCR 級(jí) 1.5mL
70904B-1.5 酵母 tRNA 溶液 B( 精提 ) 1.5mL
70904B-1.5 酵母 tRNA 溶液 B( 精提 ) 1.5mL
70904B-1.5 酵母 tRNA 溶液 B( 精提 ) 1.5mL
70904A-1.5 酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 ) 1.5mL
70904A-1.5 酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 ) 1.5mL
70904A-1.5 酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 ) 1.5mL
70903-50 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0 50 次
70903-50 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0 50 次
70903-50 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0 50 次
70903-100 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0 100 次
70903-100 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0 100 次
70903-100 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0 100 次
70902-1.5 甜菜堿溶液，5M，PCR 級(jí) 1.5mL
70902-1.5 甜菜堿溶液，5M，PCR 級(jí) 1.5mL
70902-1.5 甜菜堿溶液，5M，PCR 級(jí) 1.5mL
70901-50 柱式真菌 DNAout 50 次
70901-50 柱式真菌 DNAout 50 次
70901-50 柱式真菌 DNAout 50 次
70804-50 一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout 50 次
70804-50 一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout 50 次
70804-50 一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout 50 次
70803-1000 免質(zhì)粒提取篩選試劑盒 1000 次