公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

商品介紹：

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

M2-型丙酮酸激酶(PKM2)卵白蛋白偶聯(lián)物英文名稱：OVA Conjugated Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)Hamster (Chinese hamster，倉鼠)

M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)Homo sapiens (Human，人)

MARCKS相關(guān)蛋白(MARCKSL1)重組蛋白英文名稱：Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)Homo sapiens (Human，人)

NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase 1 (ND1)Mus musculus (Mouse，小鼠)   

注意事項(xiàng)：

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ankyrin B產(chǎn)品名稱: 錨定蛋白B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse

LPA1產(chǎn)品名稱: 溶磷脂suan受體蛋白1/EDG2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

Focadhesin產(chǎn)品名稱: Focadhesin蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig

CaMKII delta產(chǎn)品名稱: 鈣/鈣調(diào)su依賴蛋白激mei2D(CaMKIIδ)抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat, Pig, Cow

Phospho-FoxO1 (Ser329)產(chǎn)品名稱: 叉頭蛋白家族1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

TFF1產(chǎn)品名稱: 乳雌激su誘導(dǎo)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

NS5ATP9產(chǎn)品名稱: 丙型毒非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep

NAPG產(chǎn)品名稱: 可溶性NSF附著蛋白γ-SNAP抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

ATR交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

應(yīng)用類型: Other英文名稱: NCAM英文別名: CD56 antigen; Cell Adhesion Molecule Neural 1; MSK39; N CAM 120; N CAM 140; N CAM 180; NCAM 1; NCAM 120; NCAM 140; NCAM1; Neural cell adhesion molecule 1 120 kDa isoform; Neural cell adhesion molecule 1 140 kDa isoform; Neural cell adhesion molecule 1; NCAM1_HUMAN.   

耦合因子6(CF6)重組蛋白人肌suan轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CRT)ELISA試劑盒CRT肌suan轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白elisa kitHuman Creatine Transporter(CRT)ELISA Kit

人肌收縮蛋白(MYOT)ELISA試劑盒MYOT肌收縮蛋白ELISA試劑盒Human Myotilin(MYOT)ELISA Kit

人肌神經(jīng)蛋白(MYNN)ELISA試劑盒MYNN肌神經(jīng)蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Myoneurin(MYNN)ELISA Kit

人肌球蛋白重鏈9(MYH9)ELISA試劑盒MYH9肌球蛋白重鏈9elisa檢測試劑盒Human Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle(MYH9)ELISA Kit

人肌球蛋白重鏈7B(MYH7B)ELISA試劑盒MYH7B肌球蛋白重鏈7Belisa kitHuman Myosin Heavy Chain 7B, Cardiac Muscle Beta(MYH7B)ELISA Kit