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產(chǎn)品名稱：植物花色苷測(cè)試盒說明書

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6711

測(cè)定意義

花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素，屬黃酮類化合物?；ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中，使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色，是植物主要的呈色物質(zhì)。

測(cè)定原理：

采用pH示差法測(cè)定花色苷含量，當(dāng)pH為1.0時(shí)花色苷在530nm處有最大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時(shí),花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式,在530處無吸收峰, 利用此特性分別測(cè)定在不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值。pH示差法減少了溶液pH和溶劑差異的影響，排除了其他非花色苷類物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-human IgG 小鼠抗人IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

3-磷酸甘油醛脫氫酶 Anti-GAPDH 0.1ml

Goat Anti-rabbit IgG/Bio 生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml

FKBP38 英文名稱： 肽基脯酸異構(gòu)酶酶FKBP8抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SMC1(Ser957) 磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-human IgG 小鼠抗人IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

LRP/MVP (Lung resistance related protein) 肺耐藥相關(guān)蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CR1/CD35 Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PABP 多聚腺苷酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

STK4 Kit Human 人 STK4 / MST1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TUBA4A 英文名稱： 微管蛋白4α抗體 0.1ml

CD73 英文名稱： CD73抗體 0.2ml

Anti-CR1/CD35 Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

4EBP2 英文名稱： eIF4E結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml

Estrogen Receptor alpha 英文名稱： 雌受體α抗體 0.1ml

色素上皮源性因子抗體 Anti-PEDF 0.1ml

Anti-SSTR2 /FITC 熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)抑素受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Myt1(Ser83) 磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格 0.1ml

MMP-1(matrix metalloproteinases-1) 基質(zhì)金屬蛋白酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
植物花色苷測(cè)試盒說明書蕓苔素內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)云南白藥對(duì)照品組織TRKB酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,基體:酮)沒食子酸酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

啶蟲脒(標(biāo)準(zhǔn)品)廣藿香油組織酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

多菌靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)D-無水葡萄糖VEGFR1（FLT-1）酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)甲基正壬酮組織VEGFR1（FLT-1）酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

鹽酸水蘇堿(標(biāo)準(zhǔn)品)對(duì)甲氧基桂皮酸乙酯VEGFR2酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

異水飛薊賓(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%)芝麻素組織VEGFR2酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

3,3’-二沒食子酸酯茶黃素(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))異皮啶YES酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。