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參 考 價 | 面議 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YS-02X9915 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產品名稱:小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9915
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依賴性激酶6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
膜輔蛋白/內源性輔助因子活性蛋白抗體 CD46/MCP/membrane cofactor protein 0.1ml
SHC 英文名稱: SH2結構域轉化蛋白1抗體 0.2ml
phospho-eIF4EBP1 (Thr37 + Thr46) 英文名稱: 磷酸化4E結合蛋白1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-GluR1(Ser836) 磷酸化谷受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依賴性激酶6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
VDAC peptide 電壓依賴性陰離子通道抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCMT1 天門冬甲基轉移酶PCMT抗體 規(guī)格 0.2ml
IL12B Kit Human 人 IL12B / NKSF2 / p40 ELISA配對抗體 ELISA
TBRG4 英文名稱: 轉化生長因子β調節(jié)蛋白4抗體 0.2ml
C21orf54 英文名稱: 21號染色體開放閱讀框54抗體 0.2ml
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Goat IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗羊IgM 0.1ml
FMDV Polyprotein (3A protein) 英文名稱: 口蹄疫病毒A型抗體 0.2ml
雌受體α/β抗體 ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 0.1ml
Peptide YY/PYY/FITC 熒光素標記酪酪肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser235) 磷酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat human IgM/Gold 金標記羊抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 體外微管蛋白聚合作用(polymerization)熒光檢測試劑盒20次人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒,
體內微管蛋白聚合作用(polymerization)檢測試劑盒5次人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒,
細胞骨架(肌動蛋白微絲;F-ACTIN)綠色熒光染色試劑盒10次人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒,
細胞骨架(肌動蛋白單體;G-ACTIN)紅色熒光染色試劑盒10次人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒,
微管(microtubules)熒光染色試劑盒10次小鼠糖原合成酶酶(GSK)ELISA試劑盒,
粘著斑蛋白(vinculin)熒光染色試劑盒10次小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒,
驅動蛋白(kinesin)型ATP酶活性酶連續(xù)反應光譜法定量檢測試劑盒20次小鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒,
3,4-二氫嘧啶酮衍生物Monastrol(K-ATPase 抑制劑)小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒,
細胞αSMA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒,
載玻片細胞αSMA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒,
凍切片組織αSMA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次倉鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒,
石蠟切片組織αSMA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒,
載玻片細胞αSMA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒,
凍切片組織αSMA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒,
石蠟切片組織αSMA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬生長素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒,
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