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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞培養(yǎng)基>> 肺成纖維細胞*培養(yǎng)基
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-22 20:43:58瀏覽次數(shù):302次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X9984 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:肺成纖維細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X9984
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
Tubulin- Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Caspase-8 (pro Mch5) 半胱蛋白酶8抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
鋅指蛋白300抗體 ZNF300 - middle 0.1ml
SLC9A9 英文名稱: 鈉氫通道蛋白9家族A9抗體 0.2ml
ERMAP 英文名稱: 紅細胞膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IGF1R(Tyr980) 磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Caspase-8 (pro Mch5) 半胱蛋白酶8抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
IL-12 大鼠白介素-12Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
DDX4/MVH DDX4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Nectin 4 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
Human leukoregulin,LR ELISA Kit 人白細胞調(diào)節(jié)素 96T
Synaptotagmin-14 英文名稱: 突觸結(jié)合蛋白14抗體 0.2ml
CT27 英文名稱: /抗原27抗體(高遷移率族蛋白) 0.2ml
DDX4/MVH DDX4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Mouse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
FPRL1 英文名稱: 脂氧素受體1抗體 0.1ml
細胞表面趨化因子受體3抗體 CXC-R3/CD183 0.2ml
P311 protein/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-VEGFR2(Tyr951) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit mouse IgG-Fc/Biotin 生化兔抗小鼠IgG-Fc IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
肺成纖維細胞*培養(yǎng)基全血線粒體DNA萃取試劑盒10/20次4-甲基傘形酮酰-α-D-吡喃糖苷
純化線粒體DNA萃取試劑盒20次人Smad1 ELISA試劑盒,
細胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒10次人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒,
細胞/組織基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒10/20次人抗甲型肝炎病IgM抗體(anti-HAV)ELISA試劑盒, anti-HAV ELISA
DNA產(chǎn)物去鐵純化試劑盒20次人過氧化物酶體增殖物活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒,PPAR-α ELISA
果菜類食物DNA分離試劑盒10次人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒,iFABP ELISA
稻麥類食物DNA分離試劑盒10次人擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒,
乳品類食物DNA分離試劑盒10次人chemerin ELISA試劑盒,
食物DNA高質(zhì)純化試劑盒20次小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒,
油脂DNA萃取試劑盒10次小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒,
動物毛發(fā)DNA萃取試劑盒20次大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒,
動物牙齒DNA萃取試劑盒20次豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒,
動物指(趾)甲DNA萃取試劑盒20次兔子B瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒,
動物骨DNA萃取試劑盒20次產(chǎn)培養(yǎng)基
法醫(yī)學(xué)基因組DNA萃取試劑專題YGC瓊脂用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法)
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