1購(gòu)買(mǎi)的原代細(xì)胞出現(xiàn)死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因是什么？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。胎牛血清使用錯(cuò)誤或胎牛血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80℃太久。

2購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為什么會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少的情形？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少， 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷， 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。

3培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒(méi)有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。

4什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為pH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類(lèi)激素的作用，(特別是雌激素)。為避免固醇類(lèi)反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類(lèi)細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。

5L-谷氨酰胺在原代細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解，但是確切的降解率一直沒(méi)有zui終定論。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性。

6GlutaGRO-I（corning 25-015-CI）是什么？培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaGRO-I？這個(gè)二肽有多穩(wěn)定？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
GlutaGRO-I二肽是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaGRO-I二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘， GlutaGRO-I二肽溶液有zui小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎*降解。

7Hank’s 平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用，不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么？Hank’s 平衡鹽溶液(HBS)和Earle’s平衡鹽溶液(EBS)有什么本質(zhì)的功能差別？
問(wèn)＆答-------------------------------------------
HBS和EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (0.35g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的pH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中，溶液會(huì)變堿，Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagles液，如果僅僅是清洗將要在原代細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織，用Hanks液就可以了。