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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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不同細(xì)胞培養(yǎng)基的除菌方式及注意事項(xiàng)2017/5/4
細(xì)胞系培養(yǎng)基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過(guò)濾除菌,不同的培養(yǎng)基由于其營(yíng)養(yǎng)成份不同,滅菌方式也可能不同。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓滅菌。因?yàn)楦邏簻缇灼茐募?xì)胞培養(yǎng)基中的一些成份,如某些維生素等,因此,在...
人外周T細(xì)胞的分離與鑒定2017/4/27
材料:淋巴細(xì)胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法(1)取上述配好之淋巴細(xì)胞懸液0.1ml于潔凈小試管中,加入1%SRBC懸液0.1ml...
原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)器具清洗步驟2017/4/25
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)器具清洗l玻璃類(lèi)1、主要有:培養(yǎng)瓶,血清瓶,小青瓶,移液管,離心管,試管,培養(yǎng)皿等。2、清洗步驟:泡在含有洗潔凈的自來(lái)水中→撈出來(lái)用毛刷將實(shí)驗(yàn)器具各個(gè)面刷洗至少25遍→自來(lái)水沖洗25遍→過(guò)...
影響哺乳動(dòng)物細(xì)胞復(fù)蘇的因素2017/4/20
影響哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞復(fù)蘇的因素包括:(a)細(xì)胞類(lèi)型,(b)生長(zhǎng)階段,(c)細(xì)胞處于細(xì)胞周期的哪個(gè)階段,(d)終懸液中的細(xì)胞數(shù)量和濃度??赏ㄟ^(guò)優(yōu)化以上因素來(lái)提高復(fù)蘇細(xì)胞活力,另外,還需考慮凍存保護(hù)劑的特...
神經(jīng)細(xì)胞分散培養(yǎng)2017/4/18
(一)細(xì)胞系選材常用胚胎動(dòng)物或新生鼠神經(jīng)組織。雞胚常用胚齡6-8d,新生鼠或胎鼠(12-14d)或人胚胎。不過(guò)也有認(rèn)為與組織相關(guān)。如大白鼠胚胎以19d為宜,小鼠以18d為宜,大鼠紋狀體以10d為宜;若...
巨核細(xì)胞基本生理功能分析2017/4/13
巨核細(xì)胞株雖然在骨髓的造血細(xì)胞中為數(shù)zui少,僅占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.05%,但其產(chǎn)生的血小板卻對(duì)機(jī)體的止血功能極為重要。每個(gè)巨核細(xì)胞均可產(chǎn)生1000-6000個(gè)血小板。生成血小板的巨核細(xì)胞也是從骨...
原代細(xì)胞核的分離提取2017/4/11
(一)原代細(xì)胞操作步驟1.用頸椎脫位的方法處死小白鼠后,迅速剖開(kāi)腹部取出肝臟,剪成小塊(去除結(jié)締組織)盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中,反復(fù)洗滌,盡量除去血污,用濾紙吸去表面的液體。2.將濕重約1...
程序降溫盒提高細(xì)胞凍存的存活率的方法2017/4/6
1.細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度,需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來(lái)用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮,貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移,不然會(huì)影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?,F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-8...
原代細(xì)胞培養(yǎng)玻璃器皿的清洗2017/4/1
①原代細(xì)胞浸泡:新購(gòu)進(jìn)的玻璃器皿常帶有灰塵,呈弱堿性,或帶有鉛、碑等有害物質(zhì),故先用自來(lái)水浸泡、水洗,然后再用2%~5%鹽酸浸泡或煮沸30min,水洗。要領(lǐng):培養(yǎng)用后的玻璃器皿要立即泡入清水中,使下道...
原代細(xì)胞線粒體膜勢(shì)能的檢測(cè)2017/3/30
原代細(xì)胞線粒體在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著樞紐作用,多種細(xì)胞凋亡刺激因子均可誘導(dǎo)不同的細(xì)胞發(fā)生凋亡,而線粒體跨膜電位的下降,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中zui早發(fā)生的事件,它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃...
哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)錄調(diào)控原理分析2017/3/28
細(xì)胞系RNA聚合酶II是三大RNA聚合酶之一,存在于基因轉(zhuǎn)錄裝置的核心位置,編碼蛋白質(zhì)基因的轉(zhuǎn)錄受到RNA聚合酶的調(diào)控。RNA聚合酶解開(kāi)DNA雙鏈,沿著一條鏈移動(dòng)。在移動(dòng)過(guò)程中,它們一邊“解讀”DNA...
過(guò)氧化物酶標(biāo)記測(cè)定法原理2017/3/23
腫瘤細(xì)胞原理:脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細(xì)胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了報(bào)告酶(...
新生小鼠頸上交感神經(jīng)元分散細(xì)胞培養(yǎng)2017/3/21
原代細(xì)胞交感神經(jīng)系統(tǒng)在維持機(jī)體的正常功能和對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性反應(yīng)中起著十分重要的作用。交感神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)特別有助于神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育和可塑性研究,利用體外培養(yǎng)系統(tǒng)可進(jìn)行交感神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)生、死亡、形態(tài)和生化發(fā)育、遞...
常見(jiàn)的細(xì)胞因子受體檢測(cè)的方法介紹2017/3/16
(一)活細(xì)胞系吸收試驗(yàn)原理將過(guò)量的待測(cè)細(xì)胞與*細(xì)胞因子共孵育,若細(xì)胞膜表面存在相應(yīng)的細(xì)胞因子受體即可結(jié)合細(xì)胞因子,通過(guò)測(cè)定前、后細(xì)胞因子生物活性的對(duì)比情況可推測(cè)待測(cè)細(xì)胞表面細(xì)胞因子受體是否存在。方法1...
原代細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作步驟2017/3/14
(一)原代細(xì)胞計(jì)數(shù)1、將血球計(jì)數(shù)板及蓋片用擦試干凈,并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板上。2、將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿(mǎn)蓋片和計(jì)數(shù)板之間。3、靜置3分鐘。4、鏡下觀察,計(jì)算計(jì)數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù),壓...

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