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PCR完成后，建議將反應(yīng)液于1000× g (大約4000 rpm) 離心1～3 min以沉淀血細(xì)胞碎片，之后取上清進(jìn)行下游分析。該步驟可有效去除多種血液組分。當(dāng)使用高濃度血液模板時(shí)此步尤為重要，因?yàn)榻?jīng)過(guò)PCR循環(huán)，反應(yīng)管中會(huì)存在大量的血細(xì)胞碎片。這些碎片會(huì)干擾下游的檢測(cè)，如瓊脂糖電泳檢測(cè)。注意：由于血液本身的原因，PCR 結(jié)束后在 PCR 管的底部會(huì)出現(xiàn)透明凝膠狀物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象。
氣單胞菌通用PCR試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題與解決方法
在PCR結(jié)果分析時(shí)，不管是陽(yáng)性結(jié)果或陰性結(jié)果，如果沒(méi)有對(duì)照反應(yīng)，都不能確定結(jié)果是否可靠。為了便于后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析，建議在進(jìn)行PCR時(shí)，設(shè)置陽(yáng)性和陰性PCR對(duì)照反應(yīng)以便于排除假陽(yáng)性或假陰性的干擾。
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