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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928排名
  • EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928排名

貨物所在地:上海上海市

地: 進(jìn)口、國產(chǎn)

更新時間:2024-12-11 21:00:06

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

17-0130    NcoI    200U
22-0520-25    NBD-Cl    25mg
22-0510-25    NAO     25mg
23-0500-2    NAC( 抗氧化劑 )    2g
CAS538-75-0    N,N,- 二環(huán)已基碳化二亞胺    25g
CAS10191-18-1     N,N- 雙 (2- 羥乙基 )-3- 氨基乙磺酸    5g
CAS616-91-1    N- 乙酰 -L- 半胱氨酸    5g
CAS7512-17-6    N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖    5g
CAS29836-26-8    n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷    1g
131046-1    n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷    1g
CAS5704-04-1    N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘氨酸    10g
CAS7365-44-8    N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸    5g
CAS3483-82-7    N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯    1g
CAS7365-82-4    N- 氨基甲酰甲基乙磺酸    5g
CAS150-25-4    N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸    10g
111105-500    MTT 檢測試劑盒    500 次
140634-500    MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒    500 次
80817-25    mRNA 提取試劑盒    25 次
22-0500-20    MQAE( 氯離子熒光探針 )    20mg
22-0490-25    Monobromobimane [mBBR]    25mg
23-0490-100    Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )    100mg
130307-5    MnCl2溶液,25mM,PCR 級    5mL
131209-1000    MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)    1000U
60905-10000    MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶    10000U
60905-50000    MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶    50000U
22-0480-1    MM4-64(FM®4-64)    1mg
22-0470-1    MM1-43(FM®1-43)    1mg
17-0110    Mlu    1000U
22-0460-50    Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )    50μL
131042-25    miRNA 熒光定量檢測試劑盒    25 次
70608-1.5    miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×    1.5mL

 

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