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人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：8，12；D16S539：12；D18S51：18；D19S433：14；D21S11：29，32.2；D2S1338：18，19，27；D3S1358：14，17；D5S818：12；D7S820：8，12；D8S1179：12；FGA：24，25；TH01：9，9.3；TPOX：8，11；vWA：15，16；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，*進(jìn)口來源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

90207-10    JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10
90208-10    SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10
90211-100    低載量 PCR 片段純化試劑盒    100 次
90211-50    低載量 PCR 片段純化試劑盒    50 次
90212-100    高載量 PCR 片段純化試劑盒    100 次
90212-50    高載量 PCR 片段純化試劑盒    50 次
90301-25    RNA 級 Oligo(dT) 纖維素    25mg
90302-5    MgCl2溶液，25mM，PCR 級    5mL
90303-1    硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )    1套
90306A-100    胰酶消化液 ( 含 EDTA)    100mL
90306B-100    胰酶消化液 ( 無 EDTA)    100mL
90307-100    青鏈霉素溶液    100mL
90308-25    親和硅烷     25mL
90309-100    紅細(xì)胞裂解液 B 型 ( 流式細(xì)胞分析用 )     100mL
90311-100    Tricine 干粉，電泳級     100g
90313-250    TBE 電泳液 ,10×    250mL
90313-2500    TBE 電泳液 ,10×    2500mL
90314-50    柱式尿液 DNAout    50 次
90315-100    非凍型尿液 DNA 保存液    100mL
90315-15    非凍型尿液 DNA 保存液    15mL
90317-30    一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝    30 次
90318-50    柱式 DNA 清除劑    50 次
90402-50    蛋白膠微量回收試劑盒    50 次
90403-5    蛋白膠中量回收試劑盒    5次
90404-50    柱式植物 RNAout 2.0    50 次
90407A-5    lambda(λ)DNA    5μg
90407B-5    lambda(λ)DNA    5μg
90407C-5    lambda(λ)DNA    5μg
90408-100    即用型熒光定量 PCR 試劑盒    100 次
90408-600    即用型熒光定量 PCR 試劑盒    600 次
90501-250    Tth DNA 聚合酶    250U
90502-200    AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶    200U
90503-100    電泳級甘油    100mL
90504-10    XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10
90505-10    BL21(DE3) 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10