蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Active Calpain 3 (CAPN3)

CANPL3; p94; LGMD2; LGMD2A; nCL1; Calcium-activated neutral proteinase 3; Muscle-specific calcium-activated neutral protease 3; New calpain 1

型號：GOY-01D3147

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.5

應用：Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant 5'-Nucleotidase, Mitochondrial (NT5M)產(chǎn)品名稱：線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白物種：Mouse，小鼠dNT-2; dNT2; mdN; 5'(3')-deoxyribonucleotidase, mitochondrial

Recombinant Myeloperoxidase (MPO)產(chǎn)品名稱：髓過氧化物酶(MPO)重組蛋白物種：Pig，豬酶與激酶

Recombinant Otubain 1 (OTUB1)產(chǎn)品名稱：卵巢腫瘤蛋白1(OTUB1)重組蛋白物種：Rat，大鼠HSPC263; OTB1; OTU1; OTU Domain,Ubiquitin Aldehyde Binding 1; Deubiquitinating enzyme OTUB1; Ubiquitin-specific-processing protease OTUB1

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

QGY-7701, 人肝細胞gersion

5-羥甲基;5-Hydroxymet 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 Caki-2(人腎透明細胞細胞)5×106cells/瓶×2

去氫駱駝蓬堿;Harmine? 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

 ;Artesunate 規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢

 MRC5/成纖維細胞株國產(chǎn)gersion

L-羥脯氨 ;L-Hydroxypro 規(guī)格： 50mg 訂購|咨詢

 HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)細胞系

;Sodium Aescina 規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢

 Calu-3(人肺腺細胞)5×106cells/瓶×2

去甲;Norcantharidin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 EPC, 大鼠血管內(nèi)祖細胞

;Troxerutin 規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢

 小鼠腎系膜細胞培養(yǎng)基100mL

去基姜黃素;Demethoxycur 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

鈣蛋白酶3(CAPN3)活性蛋白人小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)免疫試劑盒進口、分裝

2 ug SuperCos 1 SuperCos 1 低溫運輸，-20℃保存

60U Poly（U）聚合 Poly(U) Polymerase -20℃保存

100mL TB Solution-III   TB Solution-III   常溫保存

李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA) Modified Mcbride Agar Base 250g

人抗肝腎微粒體抗體(LKM)免疫試劑盒

人梅毒螺旋體(TP)抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝

2mg 亮抑肽 Leupeptin  -20℃保存

2 ug pET-3b pET-3b 低溫運輸，-20℃保存

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

30次 DNA快速連接試劑盒 Rapid DNA Ligation Kit -20℃保存