蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Acid Phosphatase 6, Lysophosphatidic (ACP6)

LPAP; ACPL1; PACPL1; Acid phosphatase-like protein 1; Lysophosphatidic acid phosphatase type 6

型號(hào)：GOY-01D2395

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：47.4kDa

實(shí)際分子量：47kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg33~Glu413 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mMNaHCO3, 500mMNaCl, pH8.3, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

解整合素金屬10(ADAM10)重組蛋白英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)CD156-C; CD156c; MADM; Kuz; CDw156; Kuzbanian protein homolog; Mammalian disintegrin-metalloprotease物種：Rat，大鼠

組織K(CTSK)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X物種：Dog，犬

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2a)重組蛋白英文名稱：Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a)CAMKA物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞)PBS

遠(yuǎn)志（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Polygalacic acid

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae赭鮭色正青霉 Eupenicillium ochrosalmoneum

遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Senegenin

 大鼠表皮黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基胰腺

蕓香柚皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Narirutin

 球孢鏈霉菌 Streptomyces globisporus大肥菇 Agaricus bitorquis

月桂（香葉） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥80%，標(biāo)準(zhǔn)品 Myrcene

 宇佐美曲霉 Aspergillus usamii小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

澤瀉B醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Alisol B 23-acetate

 疣孢脆柄菇 Psathyrella velutina植物桿菌 Lactobacillus plantarum

獐牙菜苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Sweroside

 小鼠艾氏腹水細(xì)胞費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

獐牙菜苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Swertiamarin

 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞)

樟腦（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96%，標(biāo)準(zhǔn)品 Camphor

溶血磷脂酸酸性磷酸酶(ACP6)重組蛋白大鼠2 ug pGL4.37[luc2P/ARE/Hygro] pGL4.37[luc2P/ARE/Hygro] 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

25g 琥珀酸 ( 丁二酸 ) Succinic Acid 室溫干燥保存

50T 貓衣原體PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50T 人線粒體DNA PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人c-fos 免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

250mL HEPES Buffer,1M,pH8.5  HEPES Buffer,1M,pH8.5  常溫保存

2 ug pKK 232-8 pKK 232-8 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH8.5   MES Buffer,1.0M,pH8.5   常溫保存

人高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒

250mg 直鏈淀粉 Amylose 室溫干燥保存