產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)

PDHCE1A; PHE1A; PHE1-A; PDHa; PDH-A; Pyruvate Dehydrogenase(lipoamide)Alpha 1; Pyruvate Dehydrogenase E1 Component Subunit Alpha,Aomatic Form,Mitochondrial; Pyruvate Dehydrogenase Alpha

型號(hào)：GOY-01D326

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：線粒體

預(yù)測(cè)分子量：41.5kDa

實(shí)際分子量：46kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Phe30~Ser390 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Neprilysin (CD10)  產(chǎn)品名稱：腦啡肽酶(CD10)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 17 (MMP17)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬17(MMP17)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2 (Rock2)  產(chǎn)品名稱：含Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)  產(chǎn)品名稱：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Bruton'S Tyrosine Kinase (Btk)  產(chǎn)品名稱：布魯東氏激酶(Btk)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cα(PKCa)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化致癌基因C-Myc抗體 phospho-C-Myc(Thr358)

氧化酶亞基6B抗體 COX6B

磷酸化致癌基因C-Myc抗體 phospho-C-Myc (Thr373)

細(xì)胞色素P450 11B1抗體 CYP11B1

環(huán)磷酸鳥苷抗體 cGMP

內(nèi)皮因子維生素B12受體抗體 Cubilin

原癌基因cMAF抗體 c-Maf

18號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體 C18orf56

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體 C19orf46

原癌基因cMAF抗體 c-Maf

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框22抗體 C3orf22

電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體 CACNA1A

丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白人釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSCs）

猴菌嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺細(xì)胞系

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus香菇 Lentinula edodes

靈芝 Ganoderma lucidium酸鏈球菌 Lactococcus lactis

小鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基小鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)基

泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

根瘤菌 Rhizobium sp.香菇 Lentinula edodes

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)

人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.

 人肝細(xì)胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna