蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Glucokinase (GCK)

GK; GLK; HHF3; HK4; HKIV; HXKP; MODY2; Hexokinase-D; Hexokinase 4; Maturity Onset Diabetes Of The Young 2

型號：GOY-01D282

酶與激酶

代謝通路

內分泌學

營養(yǎng)代謝

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核, 細胞質

預測分子量：54.1kDa

實際分子量：54kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Asp194~Gly410 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：4.5

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD)  產品名稱：硬脂酰去飽和酶(SCD)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD)  產品名稱：硬脂酰去飽和酶(SCD)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Flavin Containing Monooxygenase 1 (FMO1)  產品名稱：含黃素單加氧酶1(FMO1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Inosine 5'-Monophosphate Dehydrogenase 2 (IMPDH2)  產品名稱：-5'-單磷酸脫氫酶2(IMPDH2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Phosphodiesterase 1A, Calmodulin Dependent (PDE1A)  產品名稱：磷酸二酯酶1A(PDE1A)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Phosphodiesterase 1C, Calmodulin Dependent (PDE1C)  產品名稱：磷酸二酯酶1C(PDE1C)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

睫狀神經營養(yǎng)因子抗體 CNTF

柯薩奇病毒A16型聚合酶3D Cox A16 polymerase3D

細胞角蛋白16抗體 CK16

4號染色體開放閱讀框17抗體 C4orf17

細胞質脆性X智力低下蛋白結合蛋白2抗體 CYFIP2

胸腺基質淋巴細胞生成素受體抗體 CRLF2

細胞角蛋白12抗體 CK12

半γ合成酶抗體 Ceramide glucosyltransferase

補體C2抗體 Complement C2

造血干細胞抗原CD133抗體 CD133

細胞表面趨化因子受體3抗體 CXCR3

內毒素受體抗體 CD14

葡萄糖激酶(GCK)重組蛋白大鼠費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium frediiAsPC-1(人胰腺細胞)

桿菌屬 Lactobacillus sp.棒桿菌 Corynebacterium glutamicum

T/G HA－VSMC(人血管平滑肌細胞)小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞

球孢白僵菌 Beauveria bassianaNEC(人食管細胞)

IMR-32(人神經母細胞瘤細胞)胰(含10mL 酶解緩沖液)

膠韌革菌植物桿菌 Lactobacillus plantarum

苜蓿中華根瘤菌宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipesMCF-7 [MCF7], 人腺細胞系

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人胚肺成纖維樣細胞人成骨肉瘤細胞

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris5637(人膀胱細胞)

保加利亞桿菌 Lactobacillus bulgaricus人臍動脈平滑肌細胞

大豆慢生根瘤菌酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis