產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Glucokinase (GCK)

GK; GLK; HHF3; HK4; HKIV; HXKP; MODY2; Hexokinase-D; Hexokinase 4; Maturity Onset Diabetes Of The Young 2

型號：GOY-01D280

酶與激酶

代謝通路

內(nèi)分泌學(xué)

營養(yǎng)代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：29.3kDa

實(shí)際分子量：29kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Asp3~Val226 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：4.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2 (ACAT2)  產(chǎn)品名稱：乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Asparagine Synthetase (ASNS)  產(chǎn)品名稱：天冬酰胺合成酶(ASNS)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)  產(chǎn)品名稱：蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)  產(chǎn)品名稱：蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A)  產(chǎn)品名稱：ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group III (PLA2G3)  產(chǎn)品名稱：Ⅲ組磷脂酶A2(PLA2G3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

2號染色體開放閱讀框57抗體 C2orf57

2號染色體開放閱讀框55抗體 C2orf55

2號染色體開放閱讀框29抗體 C2orf29

3號染色體開放閱讀框21抗體 C3orf21

1號染色體開放閱讀框74抗體 C1ORF74

補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體 C1QTNF10

1號染色體開放閱讀框93抗體 C1orf93

1號染色體開放閱讀框94抗體 C1orf94

1號染色體開放閱讀框41抗體 C1orf41

1號染色體開放閱讀框144抗體 C1orf144

1號染色體開放閱讀框96抗體 C1orf96

4號染色體開放閱讀框3抗體 C4orf3

葡萄糖激酶(GCK)重組蛋白人泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠白血病細(xì)胞

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞)RK1(大鼠腎細(xì)胞)

豐加鏈霉菌灰白亞種 Streptomyces toyocaensis subsp. incanus泡盛曲霉 Aspergillus awamori

大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基間型酒香酵母 Brettanomyces intermedius

苜蓿中華根瘤菌蘇云金芽胞桿菌達(dá)爾可他亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dakota

Hepa 1-6, 小鼠肝細(xì)胞NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞)

馬克斯克魯維酵母 Kluyceromyces marxianus根瘤菌

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis大鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

考馬斯亮藍(lán)G-250人少突膠質(zhì)細(xì)胞

哈茨木霉熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

瓦克青霉 Penicillium waksmanii大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基

成纖維細(xì)胞里氏木霉 Trichoderma reesei