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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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蛋白激酶R(PKR)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-02 16:30:32瀏覽次數(shù):262次

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同類優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品更多>
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D213 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Protein Kinase R (PKR)
物種 Homo sapiens (Human,人)
蛋白激酶R(PKR)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人內(nèi)皮素2( ET-2/EDN2)ELISA試劑盒96T 15.6-1000 pg/mL人環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人外異蛋白A(Ectodysplasin-A)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Salivary Alpha Amylase (AMY1A)  產(chǎn)品名稱:唾液α1(AMY1A)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Aconitase 1 (ACO1)  產(chǎn)品名稱:順烏頭酸酶1(ACO1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Glutamate Decarboxylase 2 (GAD2)  產(chǎn)品名稱:脫羧酶2(GAD2)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A)  產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VII (CA7)  產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅶ(CA7)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VII (CA7)  產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅶ(CA7)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

蛋白激酶R(PKR)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D213

 

 

產(chǎn)品名稱:蛋白激酶R(PKR)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Protein Kinase R (PKR)

PRKR; PRK-R; EIF2AK2; EIF2AK1; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 2; Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase; P1/eIF-2A kinase

型號(hào):GOY-01D213

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

感染免疫

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:35.8kDa

實(shí)際分子量:32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser224~Ile502 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點(diǎn):8.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

R Cadherin/CDH4 R Cadherin

鈣粘附分子10抗體 Cadherin 10

鼠細(xì)小病毒H-1株(H-1)抗體 Capsid protein VP1

22號(hào)染色體開放閱讀框9抗體 C22orf9

腫瘤高表達(dá)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白抗體 CREPT

9號(hào)染色體開放閱讀框117抗體 C9orf117

6號(hào)染色體開放閱讀框120抗體 C6orf120

補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體 C1Q

/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶抗體 CASK

老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體 CLSTN2

補(bǔ)體C1qγ鏈多肽抗體 C1QC

細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白3抗體 CPEB3

蛋白激酶R(PKR)重組蛋白人香菇 Lentinula edodes

中國倉鼠卵巢細(xì)胞英文名稱:

Sf-9(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

赭曲霉 Aspergillus ochraceus桿菌屬 Lactobacillus sp.

大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞蘆葦短蠕孢霉 Brachysporium phragmitis

紫紅曲霉 Monascus purpureus人腎近曲小管上皮細(xì)胞

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

土曲霉 Aspergillus terreus少根根霉 Rhizopus arrhizus

HCT-8(人盲腸腺細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna慶豐鏈霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus

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