產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白豬

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CLG3; Collagenase 3

型號：GOY-01D55

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

風(fēng)濕病學(xué)

物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：20.1kDa

實(shí)際分子量：20.09kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Asn123~Glu270 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 3 (GSTa3)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶α3(GSTa3)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Coagulation Factor V (F5)  產(chǎn)品名稱：Ⅴ(F5)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coagulation Factor V (F5)  產(chǎn)品名稱：Ⅴ(F5)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Coagulation Factor V (F5)  產(chǎn)品名稱：Ⅴ(F5)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1)  產(chǎn)品名稱：乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1)  產(chǎn)品名稱：乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

APXL蛋白抗體 APXL

小腸鈉通道蛋白5抗體 ACCN5

酸敏感離子通道蛋白3抗體 ASIC3

天β羥化酶抗體 Aspartate beta hydroxylase

加壓素受體2抗體 AVPR2

細(xì)胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體 ARP3

膜粘連蛋白8抗體 Annexin A8

水通道蛋白8抗體 Aquaporin 8

凋亡抑制因子5抗體 API5

水通道蛋白-3抗體 AQP3

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 ANKRD40

載脂蛋白D抗體 APOD

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白豬白色綠僵菌 Metarhizium album香菇 Lentinula edodes

穗霉屬 Spicaria sp.大麗輪枝菌-北京病圃菌系 Verticillium Verticillium dahliea Kleb

Protein A-AgaroseProtein A糖凝膠小鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeNuclei蛋白抽提試劑盒（帶酶抑制劑）

小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基人臍動脈平滑肌細(xì)胞

植物桿菌 Lactobacillus plantarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（高分化）中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae金產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces aureochrogmoenes

大鼠軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum人惡性黑色素瘤細(xì)胞

SW480(人結(jié)腸細(xì)胞)BC-009(人腺細(xì)胞)

煙草疫霉* Phytophthora nicotianae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes