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RWPE-2 (前列腺正常細胞)

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2025-04-29 11:57:51瀏覽次數(shù):255次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0429 應用領域 化工
主要用途 僅供科研使用
RWPE-2 (前列腺正常細胞)氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:液氮;溫度:37℃。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

RWPE-2 (前列腺正常細胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0429

組織來:前列腺

生長特性:貼壁細胞

細胞形態(tài):上皮細胞樣

背景描述:RWPE-2細胞是由Webber·M·M于1996年建株

生物安全等級:2 [Cells contain Human Papilloma viral (HPV) sequences]

生長培養(yǎng)基:K-SFM+0.05mg/mL BPE+5ng/mL EGF+1% P/S

推薦傳代比例:1:3-1:4

推薦換液頻率:2~3次/周

凍存條件:

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40S+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件:

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性:Yes, in nude mice. Yes, in soft agar.

受體表達情況:androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen)

抗原表達情況:kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen)

基因表達情況:cytokeratin 18, cytokeratin 8

保藏機構(gòu):ATCC; CRL-11610

RWPE-2 (前列腺正常細胞)

冷凍保存細胞之方法:

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃,30~60分鐘→ (-20℃,30分鐘) → -80℃,16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase長期儲存。

冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

培養(yǎng)操作:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4min 1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

實驗報告:

產(chǎn)品僅用于科研:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4mL酶消化液(0.1%胰和0.1%I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10%FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)。

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

RNA 級 CTAB ( 十六烷基基化銨 )100g  脂蛋白純化試劑盒50次

RNA 級 DEPC ( 焦碳酸 )10mL  脂蛋白 PAGE 染液1套

RNA 級 DTT ( 二硫代蘇糖醇 )10g  支氣管上皮細胞生長因子5mL

RNA 級 EDTA·2Na ( 四乙酸二 )100g  支氣道上皮細胞生長因子5mL

RNA 級 Guanidium HCl ( 鹽酸胍 )100g  真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100次

FITC標記的腺苷酸環(huán)化酶5抗體

FITC標記的腺苷酸環(huán)化酶4抗體

FITC標記的腺苷酸環(huán)化酶3抗體

FITC標記的腺苷酸環(huán)化酶10抗體

FITC標記的芳香胺N-乙?;D(zhuǎn)移酶抗體

RWPE-2 (前列腺正常細胞)大鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)elisa檢測試劑盒

大鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP5)elisa檢測試劑盒

大鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白8(LRP8)elisa檢測試劑盒

大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)elisa分析檢測試劑盒

大鼠低氧誘導因子1α(HIF1α)elisa檢測試劑盒


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