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犬胸腺細(xì)胞;cf2Th說明書

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-23 14:13:11瀏覽次數(shù):288次

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犬胸腺細(xì)胞;cf2Th說明書售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

犬胸腺細(xì)胞;cf2Th說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱 犬胸腺細(xì)胞;cf2Th說明書
形態(tài)特性 
生長特性 貼壁
特征特性  該細(xì)胞為幾種逆轉(zhuǎn)錄病毒的敏感株,可用于擴(kuò)增逆轉(zhuǎn)錄病毒。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  20%FBS
傳代方法  1:2-1:6,每周換液2-3次
傳代情況 
凍存條件  90%FBS+10%DMSO
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

 1,4-丁內(nèi)酯    分子式:    86.09    分子量:     C4H6O2    英文名稱:    1,4- butyl ester    CAS號:    96-48-0    
 1,2-二乙氧基乙烷    分子式:    118.17    分子量:     C6H14O2    英文名稱:    1,2- two ethylene oxide    CAS號:    629-14-1    
 二氯酞菁硅    分子式:    611.52    分子量:     C32H16Cl2N8Si    英文名稱:    Two chloride    CAS號:    19333-10-9    
 藥根堿    分子式:    338.38    分子量:     C20H20NO4    英文名稱:    Drug base    CAS號:    3621-38-3    
 吡嘧磺隆    分子式:    414.39    分子量:     C14H18N6O7S    英文名稱:    Pyrazosulfuron    CAS號:    93697-74-6    
 氟替卡松    分子式:    500.57    分子量:     C25H31F3O5S    英文名稱:    Fluticasone    CAS號:    90566-53-3    
 密滅汀A4    分子式:    542.7    分子量:    C32H46O7    英文名稱:    Mi A4    CAS號:    51596-11-3    
 梓醇    分子式:    362.33    分子量:    C15H22O10    英文名稱:    Catalpol    CAS號:    2415-24-9    
 鹽酸依立替康    分子式:    623.15    分子量:    C33H38N4O6.HCl    英文名稱:    Hydrochloric acid in accordance with    CAS號:    100286-90-6    
 五味子丙素    分子式:    384.428    分子量:    C22H24O6    英文名稱:    The C    CAS號:    61301-33-5    
 人參皂甙Rc    分子式:    1079.2685    分子量:    C53H90O22    英文名稱:    Ginsenoside Rc    CAS號:    11021-14-0    
 D(+)-五水棉子糖    分子式:    594.51    分子量:    C18H42O21    英文名稱:    D (+) - raffinose five water    CAS號:    17629-30-0    
 黃芩素    分子式:    270.24    分子量:    C15H10O5    英文名稱:    Huang Qinsu    CAS號:    491-67-8  伊紅 Y, 醇溶性    CAS15086-94-9    10g
磷酸化蛋白富集試劑盒    131066-10    10 次
1個    雜交管 (35×200mm)    
2mL    鏈霉親和素磁珠    
100 支    1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅帶芯 )    
20μL    Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)    
0.25mL    GTP 溶液,100mM    
總 SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )    18-0710-100    100 次
DNA 探針變性液    131208-10    10mL
300U    TEV 蛋白酶    
10mL    非凍型血液 RNA 保存液    
25mg    多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 )    
100 次    哺乳動物種屬鑒定 PCR Mix    
聚乙烯醇    CAS9002-89-5    100g
Western 印跡膜抗體清除劑    80813-50    50mL
RNase 抑制劑 ( 人源 )    3290-400    400U
5g    牛血紅蛋白    
1mL    AH109 酵母種    
1mg    Quin-2AM    
100mL    沉淀型 TMB 顯色試劑盒    
SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 )    22-0580-25    25mg 

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