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小鼠骨髓纤维原细胞;M2-10B4价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠骨髓纤维原细胞;M2-10B4价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液??刂拼荡虻牧Χ龋苊獠罅康钠?,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是CJ Eaves从(C57BL/6JX C3H/HeJ)F1小鼠的骨髓基质中分离建立的。M2-10B4表达层粘连蛋白和胶原蛋白IV,但并不表达胶原蛋白I。在长期培养体系中该细胞支持人或鼠的骨髓组织生成。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C7
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
1,2-Dilauroyl-sn-glycerol (100 mg)1,1’-[(1S)-1-(hydroxymethyl)-1,2-ethanediyl]ester-dodecanoic acid; 1,2-DLG; 1,2-Dilauroyl-sn-glycerol
1-O-Octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol (100 mg)2S-methoxy-3-(octadecyloxy)-1-propanol; PIA 7|2-Methyl-1-octadecyl-sn-glycerol; 1-O-Octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol
Cdk2 Inhibitor II (500 ug)4-[2-(5-bromo-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)hydrazinyl]-benzenesulfonamide; Cyclin-Dependent Kinase 2 Inhibitor II|SC-221409; Cdk2 Inhibitor II
ML-335 (25 mg)1-[[4-(acetylamino)phenyl]methyl]-4-(2-phenylethyl)-4-piperidinecarboxylic acid, ethyl ester; CYM 51010|CID-23723457; ML-335
Q-VD-OPH (5 mg)(3S)
BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture (420 wells)BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture
MAM2201 (25 mg)[1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl](4-methyl-1-naphthalenyl)-methanone; AM2201 4-methylnaphthyl analog|JWH 122 N-(5-fluoropentyl) analog; MAM2201
Palmiaidic Acid (100 mg)(9E)-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid; Palmiaidic Acid
Icilin (100 mg)AG 3-5; 3,6-dihydro-1-(2-hydroxyphenyl)-4-(3-nitrophenyl)-2(1H)-pyrimidinone
17(18)-EpETE (25 ug)(±)17(18)-epoxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 17,18-epoxy Eicosatetraenoic Acid|17,18 EEQ; 17(18)-EpETE
FABP4 Inhibitor (1 mg)A-FABP Inhibitor|ALBP Inhibitor|Adipocyte FABP Inhibitor|BMS 309403|Fatty Acid Binding Protein 4 Inhibitor|aP2 Inhibitor; 2-[[2’-(5-ethyl-3,4-diphenyl-1H-pyrazol-1-yl)[1,1’-biphenyl]-3-yl]oxy]-acetic acid
UNC0631 (5 mg)N-[1-(cyclohexylmethyl)-4-piperidinyl]-2-[hexahydro-4-(1-methylethyl)-1H-1,4-diazepin-1-yl]-6-methoxy-7-[3-(1-piperidinyl)propoxy] 4-quinazolinamine
50 次 双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 488·PI)
10μL HRP 标记的抗生物素抗体
5g 叶酸
10mL 弗氏不*佐剂
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷 CAS114162-64-0 5mg
色素细胞生长因子 - 不含 TPA 21-0090-5 5mL
一管式拭子 DNAout 60501-20 20 次
1000U RecJf 核酸外切酶
0.4mL Deaza dGTP
5次 96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )
2000U T4 核酸内切酶 V
亮绿 CAS633-03-4 5g
SMD1163 酵母菌种 12-216 1mL
30 次 一站式 CTAB-PAGE 电泳套装
10 次 克必隆 eTS miRNA RT-PCR 试剂盒
100mL 吐温 -20
500mL McCoy's5A 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )
100mL DNA Tris HCl,1M,pH7.0
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC·PI) 81025-50 50 次
DNA 电泳分子量标准 (3)pUC19/MspI 90602C-50 50 次
20L 湿法电转液 ( 干粉 )
1g 丁酸
5g 溴酚蓝
400μL 乙酰化牛血清白蛋白
L- 亮氨酸 CAS61-90-5 25g
抑氨肽酶,5mg/mL 130536-5 5mL
50 次 柱式骨骼 DNAout
(±)-CP 47,497 (solution) (5 mg)rel-2-[(1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl]-5-(2-methyloctan-2-yl)-phenol; CP 47,947; (±)-CP 47,497 (solution)
9(R)-HETE (50 ug)9R-hydroxy-5Z,7E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 9(R)-HETE
FeTMPyP (50 mg)Fe(III)tetrakis (1-methyl-4-pyridyl) porphyrin pentachlorideporphyrin pentachloride; FeTMPyP
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