小鼠胚胎成纤维细胞；NIH/3T3价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

小鼠胚胎成纤维细胞；NIH/3T3价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  NIH/3T3是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚克隆。该细胞株对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，对DNA转化及转染研究十分有用。鼠痘病毒阴性。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C84
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR  STR鉴定
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

Cycloheximide （1 g）4-[（2R）-2-[（1S，3S，5S）-3，5-dimethyl-2-oxocyclohexyl]-2-hydroxyethyl]-2，6-piperidinedione； Naramycin A|NSC 185； Cycloheximide
Memantine （hydrochloride） （100 mg）3，5-dimethyl-tricyclo[3。3。1。13，7]decan-1-amine， monohydrochloride； Akatinol|Axura|Ebix|NSC 102290|Namenda|SUN Y7017； Memantine （hydrochloride）
StemRegenin 1 （hydrochloride） （10 mg）4-（2-（（2-（benzo[b]thiophen-3-yl）-9-isopropyl-9H-purin-6-yl）amino）ethyl）phenol， monohydrochloride； SR1； StemRegenin 1 （hydrochloride）
Spectinomycin （hydrochloride hydrate） （10 g）（5aR，9aR，10aS）-decahydro-4aR，7S，9S-trihydroxy-2R-methyl-6S，8R-bis（methylamino）-4H-pyrano[3-b][1，4]benzodioxin-4-one， dihydrochloride pentahydrate； Spectinomycin （hydrochloride hydrate）
JWH 398 N-（5-hydroxypentyl） metabolite-d5 （100 ug）（4-chloronaphthalen-1-yl）（1-（5-hydroxypentyl）-1H-indol-3-yl-2，4，5，6，7-d5）methanone； JWH 398 N-（5-hydroxypentyl） metabolite-d5
Rifampicin （1 g）3-[[（4-methyl-1-piperazinyl）imino]methyl]-rifamycin； NIH 10782|NSC 113926|Rifampin； Rifampicin
Ac-DEVD-CMK （1 mg）N-acetyl-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[（1S）-1-（carboxymethyl）-3-chloro-2-oxopropyl]-L-valinamide； Ac-Asp-Glu-Val-Asp-CMK|Caspase-3 Inhibitor III； Ac-DEVD-CMK
PB-22 5-hydroxyquinoline isomer （5 mg）quinolin-5-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate； PB-22 5-hydroxyquinoline isomer
PB-22 7-hydroxyisoquinoline isomer （1 mg）isoquinolin-7-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate； PB-22 7-hydroxyisoquinoline isomer
Acetyl * （hydrochloride） （10 mg）*[1-（2-phenylethyl）-4-piperidinyl]-acetamide， monohydrochloride； Desmethyl *|MCV 4848|NIH 10485； Acetyl * （hydrochloride）
CYM 50308 （1 mg）（2Z，5Z）-5-[[1-（2，4-difluorophenyl）-2，5-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl]methylene]-2-[（2-methoxyethyl）imino]-3-methyl-4-thiazolidinone； CID-49835928|ML-248； CYM 50308131083-20天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20 次
微型离心管研磨杵 ( 无离心管 ) 50 只
Hoechst33342 干粉10mg
5- 溴 -2'- 脱氧尿苷100mg
DMEM( 低糖 )10L
CAS69-89-6黄嘌呤1g
21-0070-5 骨骼肌细胞生长因子5mL
91102-50柱式骨骼 DNAout50 次
RecA 蛋白1000μg 
DEAE 琼脂糖凝胶 6B25mL
96 孔板病毒 DNAout( 离心法 )5次
核酸内切酶 III (Nth)1000U
CAS64431-96-51，3-二[三(羟甲基)甲氨基]丙烷5g
12-269KM71 酵母菌种1mL
一氧化氮检测试剂盒 ( 硝酸还原酶法 )25 T
克必隆 eTS cDNA 文库构建试剂盒1套
透明质酸100mg
IMDM 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )500mL
DNA ，pH5.2，3M 100mL
131229-10一站式生物素 TUNEL 试剂盒 (FITC/POD)10 次
90602A-50DNA 电泳分子量标准 (3)λDNA/HindIII50 次
生物素化山羊抗亲和素0.5mg