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中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 动物用小鼠T细胞(Th1)进行免疫接种。 脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合。 在活化的小鼠T细胞上检测到表达的一个39KDa抗体蛋白。 1992年五月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代通过BM 细胞周期蛋白处理21天消除支原体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%;0.05mM β-巯基乙醇
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液??刂拼荡虻牧Χ龋苊獠罅康钠?,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Cyanine 5。5胺 [相当于Cy5。5胺]Cyanine 5。5 amine [equivalent to Cy5。5 amine]
Helix Fluor 575 琥珀酰亚胺酯Helix Fluor 575, succinimidyl ester
磺胺醋酰-KLH偶联物[用于ELISA]Sulfacetamide-KLH Conjugate
Ionomycin (calcium salt) (1 mg)11,19R,21S-trihydroxy-4R,6S,8S,12R,14R,18R,20S-heptamethyl-22-[octahydro-5’S-[1R-hydroxyethyl]-2S,5’-dimethyl[2,2’R-bifuran]-5S-yl]-9-oxo-10Z,16E-docosadienoic acid, calcium salt; Ionomycin (calcium salt)
BI6015 (50 mg)2-methyl-1-[(2-methyl-5-nitrophenyl)sulfonyl]-1H-benzimidazole; BI6015
11-deoxy-11-methylene Prostaglandin D2 (10 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-methylene-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 11-deoxy-11-methylene PGD2; 11-deoxy-11-methylene Prostaglandin D2
Prostaglandin E1 Alcohol (5 mg)1,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-9-one; 1-hydroxy Prostaglandin E1|PGE1 Alcohol; Prostaglandin E1 Alcohol
romethyl Ketone (hydrochloride) (50 mg)N-[5-ami-(2-chloroacetyl)pentyl]-4-methyl-benzenesulfonamide, monohydrochloride; TLCK|1-Chloro-3-Toxylamide-7-Amino-L-2-Heptanone; Tosyllysine Chloromethyl Ketone (hydrochloride)
trans-Resveratrol-d4 (500 ug)5-[(1E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol-2,3,5,6-d4; (E)-Resveratrol-d4; trans-Resveratrol-d4
Salermide (10 mg)N-[3-[[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)methylene]amino]phenyl]-a-methyl-benzeneacetamide; Salermide
trans-Zeatin (250 mg)2E-methyl-4-(9H-purin-6-ylamino)-2-buten-1-ol; trans-Zeatin
CAY10598 (1 mg)5-[(3S)-3-hydroxy-4-phenyl-1-buten-1-yl]1-[6-(2H-tetrazol-5R-yl)hexyl]-2-pyrrolidinone; CAY10598
KN-62 (25 mg)4-[(2S)-2-[(5-isoquinolinylsulfonyl)methylamino]-3-oxo-3-(4-phenyl-1-piperazinyl)propyl]phenyl ester, 5-isoquinolinesulfonic acid; KN-62Bradford 法蛋白定量试剂盒100mL
Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL
植物线粒体纯化试剂盒 ( 精提 )5次
23-0600-1Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 ) 1mg
130992-50玻璃珠法柱式酵母 DNAout50 次
RNase 抑制剂 ( 人源 )400U
超杂交液 A(不含甲酰胺)100mL
盐酸四环素干粉1g
环孢 A 溶液 ,10mg/mL1mL
131185-10ONPG 溶液,10mg/mL10mL
101107-100DNA CTAB 溶液,20%100mL
Southern 植物 DNAout 10 次
DMEM 培养基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )100mL
柱式真菌 DNAout50 次
ER2566 菌种1mL
中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]图片130410-7克必隆 eTS 细菌基因组差减杂交试剂盒7次
80919-196 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 离心法 )1次
水杨酸25g
大鼠中性粒细胞分离液 1.091200mL
TRIzol 伴侣50 次
二氯异香豆素溶液,10mg/mL5mL
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