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小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素);BF-11图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素);BF-11图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 可产生抗人促红细胞生成素的单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素);BF-11图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素);BF-11图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素);BF-11图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液??刂拼荡虻牧Χ龋苊獠罅康钠?,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
JWH 251 4-methylphenyl isomer (10 mg)2-(4-methylphenyl)-1-(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-ethanone; JWH 251 4-methyl isomer; JWH 251 4-methylphenyl isomer
JWH 122 8-methylnaphthyl isomer (1 mg)(8-methylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 122 8-methylnaphthyl isomer
Docosahexaenoyl Ethanolamide-d4 (500 ug)N-(2-hydroxyethyl-1,1’,2,2’-d4)-4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenamide; DEA-d4|DHEA-d4; Docosahexaenoyl Ethanolamide-d4
3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone (hydrochloride) (10 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-2-(benzylamino)propan-1-one, monohydrochloride; BMDP; 3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone (hydrochloride)
Eicosatetraynoic Acid (10 mg)5,8,11,14-eicosatetraynoic acid; ETYA; Eicosatetraynoic Acid
N-Oleoyl Glycine (100 mg)N-(9Z-octadecenoyl)-glycine; N-Oleoyl Glycine
5(S),14(R)-Lipoxin B4 (100 ug)5S,14R,15S-trihydroxy-6E,8Z,10E,12E-eicosatetraenoic acid; 5(S),14(R)-LXB4; 5(S),14(R)-Lipoxin B4
NPS 2390 (5 mg)N-tricyclo[3。3。1。13,7]dec-1-yl-2-quinoxalinecarboxamide; NPS 2390
GSK-J5 (hydrochloride) (50 mg)ethyl 3-((6-(4,5-dihydro-1H-benzo[d]azepin-3(2H)-yl)-2-(pyridin-3-yl)pyrimidin-4-yl)amino)propanoate, monohydrochloride; GSK-J5 (hydrochloride)
Nocodazole (50 mg)N-[6-(2-thienylcarbonyl)-1H-benzimidazol-2-yl]-methyl ester-carbamic acid; NSC 238159|Oncodazole|R 17934; Nocodazole
IWP-2-V2 (10 mg)N-(6-methyl-2-benzothiazolyl)-2-[[3,4,6,7-tetrahydro-4-oxo-3-(phenylmethyl)thieno[3,2-d]pyrimidin-2-yl]thio]-acetamide; Inhibitor of Wnt Production-2-V2; IWP-2-V2
4-acetoxy DMT (hydrochloride) (1 mg)3-[2-(dimethylamino)ethyl]-1H-indol-4-ol-4-acetate, monohydrochloride; 4-AcO DMT|4-acetoxy-N,N-Dimethyltryptamine; 4-acetoxy DMT (hydrochloride)
Febuxostat (50 mg)2-[3-cyano-4-(2-methylpropoxy)phenyl]-4-methyl-5-thiazolecarboxylic acid; TEI 6720|TMX 67|FBX|Uloric; Febuxostat脱脂奶粉 ( 杂交 )50g
非变性蛋白分子量标准25mg
刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
M13mp18DNA10μg
CAS10323-20-3D- 阿拉伯糖10g
60803-50可保种型蓝白 T 载体50ng
嘌呤硫5g
固绿5g
乙酰丁香酮1g
EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol
CAS9004-53-9糊精250g
12-278Rosetta-gami B(DE3)plysS 菌种1mL
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次
JM110 菌种1mL
4- 氨基 -N,N- 二甲基盐5g
HRP 稳定剂 / 稀释剂200mL
小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素);BF-11图片CAS148-24-38- 羟基喹啉5g
60209-10盐酸四环素溶液 ,50mg/mL10mL
茚三酮10g
聚乙二醇溶液25mL
瑞氏色素5g
耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)10000U
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