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小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]*操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]*现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | 小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]* |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称 小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]*
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠结缔组织),细胞系L的克隆。细胞系L是zui早建立的连续培养细胞系之一,而clone 929是zui早的克隆株。 从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松结缔组织入脂肪组织中建立了亲本细胞系L。 第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了clone929。 检测发现鼠痘病毒阴性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 马血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(560+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]*运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
9-Bromo-7,12-dihydropyrido[3’,2’:2,3]azepino[4,5-b]indol-6(5H)-one1-Azakenpaullone
MLN518; CT53518Tandutinib
AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate; SAMeS-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate
2,PRIMA-1
PaTrin-2; 6-Lomeguatrib
2-Atorvastatin
Sulfosuccinimidyl 6-(3’-[2-pyridyldithio]-propionamido)hexanoateSulfo-LC-SPDP
3,3’,4’,5,7,8-Hexahydroxyflavone-8-glucosideGossypin
4-Hydroxysphinganine, D-Ribo-1,3,4-trihydroxy-2-aminooctadecane, D-Ribo-2-aminooctadecane-1,3,4-triol, PHSPhytosphingosine
(E)-N-hydroxy-3-[3-(phenylsulfamoyl)phenyl]prop-2-enamide; BelinostatPXD101
2-JAK Inhibitor, Pyridone 6
N-(1-((cyanomethyl)carbamoyl)cyclohexyl)-4-(4-propylpiperazin-1-yl)benzamide; AAE581Balicatib
N-IWP-4
N’-(5-chloropyridin-2-yl)-N-[(1S,2R,4S)-4-(dimethylcarbamoyl)-2-[(5-methyl-6,7-dihydro-4H-[1,3]thiazolo[5,4-c]pyridine-2-carbonyl)amino]cyclohexyl]oxamide; DU 176b; DU-176; DU-176b; DU176bEdoxaban Tosylate
StemBoost Nociceptor Induction Cocktail Set (1000X), Sterile-FilteredStemBoost Nociceptor Induction Cocktail Set (1000X), Sterile-Filtered
Protein A SepharoseProtein A Sepharose
Histone H2B PeptideHistone H2B Peptide
Cholesterol Assay DMSO (2。5 ml)Dimethyl Sulfoxide; Cholesterol Assay DMSO
盐酸胺碘酮Amiodarone hydrochloride60201-1.5非酶 DNA 清除剂1.5mL
牛血清白蛋白封堵液250mL
Camptothecin( 喜树碱 )100μL
硅胶膜离心吸附柱系列 ( 小提 )50 套
DEAE 交换介质50mL
131097-100生物素化的 β- 半乳糖苷酶100U
60906-10cDNA *链合成试剂盒10 次
VDAC1 小鼠单抗100 μL
非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 ) 100mL
羧肽酶 A( 牛胰 )500 U
Hoechst33258 干粉10mg
CAS5794-13-8L- 天门冬酰胺25g
130859B-10M13mp18DNA10μg
硝酸银25g
硅基磁珠2mL
聚乙二醇 4000250g
96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次
CAS94-75-72,4- 二氯苯氧5g
12-254Stb14 菌种1mL
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]*一步法单菌落质粒 DNAout50 次
肌酸激酶测试剂盒24 T
结晶紫25g
多核苷酸磷酸化酶100mg
CAS87-51-4吲哚 -3- 1g
80807B-50动物细胞裂解液 B50mL
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