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人橫紋肌肉瘤細胞;A-204圖片

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-10 16:33:27瀏覽次數(shù):372次

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人橫紋肌肉瘤細胞;A-204圖片售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

人橫紋肌肉瘤細胞;A-204圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系源自一位患有橫紋肌肉瘤的1歲女孩的肌肉組織,由D.J. Giard建立。 
培養(yǎng)條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

胰酶消化液 ( 含 EDTA)100mL
雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒100 次
131022-0.5鏈霉親和素,AP 標記0.5mL
101005-100即用型易錯 PCR 試劑盒100 次
兔抗雞 IgY,辣根過氧化物酶標記300μL
Furin 蛋白酶50U
遺傳100mg
LB 平板培養(yǎng)基 (Tet 抗性 )10 塊
CAS9000-91-3β- 淀粉酶100g
4610-2克必隆 G 載體2μg
纖維素酶1g
谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒100 次 
尿苷 -5'- 二磷酸25mg
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次
CAS9011-18-1硫酸葡聚糖10g
12-248Rosetta 菌種1mL
液體樣品 RNAout250 次
JM103 菌種1mL鵝白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠酸性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠apelin 12(AP12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬補體片斷3b(C3b)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠脫碘酶(ID)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠乳頭瘤病毒18(HPV-18)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝

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