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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞;ACC-2圖片
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-09 17:11:54瀏覽次數(shù):349次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T-24價(jià)格
人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞;ACC-2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞;ACC-2圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 1968年建系,源自一位28歲男性腺樣囊性癌患者,人腭部小涎腺腺樣囊性癌組織小塊靜置培養(yǎng)7天細(xì)胞開始生長,*傳代50天,BALB/C,CBA,Swiss,DF裸小鼠皮下移植成瘤,表達(dá)角蛋白。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C120
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
酶水解酪素100g
氨芐青5mg
RNA DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )10mL
EGY48 酵母菌種1mL
130984-1.5DNase I 溶液1.5mL
101114-50通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次
微量樣品核酸提取試劑盒200 次
HinfI 2000U
堿性品紅5g
DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
CAS68-19-9維生素 B121g
21-0030-5 成纖維細(xì)胞生長因子 -25mL
120810-25血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒 25 次
R- 藻紅蛋白標(biāo)記親和素1mg
DEAE 交換介質(zhì)50mL
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )5次
人源脫嘌呤 / 脫嘧啶 (AP) 核酸內(nèi)切酶激酶1000U
CAS150-25-4N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸10g
12-154GS115 酵母菌種1mL
一管式植物 DNAout50 次
可溶性淀粉100g
葡聚糖 T-7010gp19miRNA 檢測試劑盒 50 次
130871-20一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次
柱式軟體動物 DNAout50 次
一管式病毒 DNA-RNAout50 次
放線菌素 D1mg
大提柱式酵母 DNAout4次
22-0130-100Congo Red 100mg
蘇丹Ⅲ5g
章魚堿25mg
YPD 液體培養(yǎng)基100mL
天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒150 次
130643-500烷基嘌呤 DNA 糖基化酶500U
葉酸5g
葡聚糖凝膠 G-1025g
新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
120626-0.25UTP 溶液,100mM0.25mL
Red-Tth DNA 聚合酶250U
MnCl2溶液,25mM,PCR 5mL
D- 果糖 -6- 磷酸二100mg
柱式葡萄球菌 RNAout50 次
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