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276次做腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的同學(xué)如果互相交流會發(fā)現(xiàn),不同的實驗室有些規(guī)則是不一樣的,初學(xué)者經(jīng)常不知對錯,小編今天就和大家總結(jié)一下這些糾結(jié)的問題,希望對你的細(xì)胞之路有所幫助。
細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活。
可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清品牌?
可以,但是不能頻繁更換。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。更換不同品牌的血清之初,可能細(xì)胞會有一個短暫的適應(yīng)過程,適應(yīng)后,好的血清會促進(jìn)細(xì)胞良好生長。建議選擇合適的放心品牌血清,而不是在假貨橫行的當(dāng)下選擇昂貴的血清,因為高價格*是假貨的重區(qū)。即使買到,也肯定造成了資金的浪費。Clark血清致力于打造國內(nèi)*放心品牌血清,從銷售渠道控制、革命性外包裝、反饋跟蹤體系和重獎打假四個方面入手,開國內(nèi)先河,保證每一瓶都是,讓用戶放心。
培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?
腫瘤細(xì)胞冷凍保存時zui常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 %原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO 稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成。
DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?
冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650),其本身即為無菌狀況,*次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4 C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜。
Chelidonine 白屈菜堿 476-32-4 20mg
Ellagic acid 鞣花酸 476-66-4 20mg
Mangiferin 芒果苷; 芒果甙 4773-96-0 20mg
Dehydrocostus lactone 去氫木香內(nèi)酯 477-43-0 20mg
Obtusifolin 決明蒽醌; 美決明子素 477-85-0 20mg
Bergenin 巖白菜素 477-90-7 20mg
Nobiletin 川陳皮素; 蜜橘黃素; 川皮亭 478-01-3 20mg
腫瘤細(xì)胞
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