亚洲精品综合日韩中文字幕网站_精品综合久久久久97_中文在线天堂网www_久久精品免费一区二区三区_91久久国产综合精品女同国语_久久资源总站在线国产成人

上海谷研實業(yè)有限公司
中級會員 | 第10年

15026555973

當(dāng)前位置:首頁   >>   資料下載   >>   單向瓊脂擴散試驗

ATCC細胞
蛋白質(zhì)產(chǎn)品
核酸擴增產(chǎn)品
elisa試劑盒
生化試劑
PCR試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品
PCR鑒定
生化試劑盒
科研細胞
分子生物學(xué)試劑
ELISA實驗檢測
蛋白
抗體

單向瓊脂擴散試驗

時間:2017-4-11閱讀:227
分享:
  • 提供商

    上海谷研實業(yè)有限公司
  • 資料大小

    7.3KB
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    24次
  • 資料類型

    JPG 圖片
  • 瀏覽次數(shù)

    227次
點擊免費下載該資料

單向瓊脂擴散試驗(Single immunodiffusion test)—人血清中IgG、IgA、IgM的測定。
單向瓊脂擴散試驗是一種定量試驗,將抗體混合于瓊脂內(nèi),傾注于玻片或平皿上,凝固后在瓊脂上打孔,再將抗原標(biāo)本加入孔內(nèi),經(jīng)過一定的時間,在孔的周圍出現(xiàn)抗原抗體復(fù)合物形成的沉淀環(huán),環(huán)的大小與抗原含量和擴散時間相關(guān)。用不同濃度的抗原制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,則未知標(biāo)本中的抗原含量即可從準(zhǔn)標(biāo)曲線中求出。本試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量。
材料
IgG、IgA、IgM免疫板、參考血清、待檢血清、微量加樣器(10微升)、量尺、紗布、生理鹽水、帶蓋方盤。
方法
1、免疫瓊脂板制備:將1.5%瓊脂(用PH8.2、0.05M的巴比妥緩沖液配成),加熱溶化,待瓊脂冷至56℃加入適量抗血清(抗血清zui終稀釋度取決于抗血清所標(biāo)化的稀釋度),混勻,制成厚1.5mm的瓊脂板,待瓊脂凝固后打孔,孔徑為3mm,孔距1~1.2cm。
2、稀釋參考血清及待檢血清:參考血清用0.5ml蒸餾水溶解后使用,參考血清、待檢血清稀釋按要求進行。
3、加樣:將上述稀釋參考血清分別滴入相應(yīng)的抗體免疫板的一排孔內(nèi),其余孔滴加待檢的稀釋血清,每個檢樣加兩個孔,每孔滴加10微升。
4、擴散:將免疫板置水平濕盤內(nèi),放進37℃溫箱,IgG免疫板擴散24小時,IgA、IgM板48小時后取出置黑色背景前觀察結(jié)果,(如果沉淀環(huán)不清晰,也可用1%鞣酸液浸泡免疫板半小時后觀察),必要時可以染色后觀察。
5、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線及血清標(biāo)本中IgG、IgA、IgM定量測定:測量沉淀環(huán)直徑。沉淀環(huán)直徑的大小除與抗原量相關(guān),還與分子量和擴散時間有關(guān)。這種沉淀環(huán)直徑與抗原含量的關(guān)系不是直線相關(guān),而是對數(shù)關(guān)系,這種關(guān)系有兩種計算方法:
(1)Mancini曲線-適用于大分子抗原和長時間擴散(>48小時)的結(jié)果處理。使用方格計算紙劃線,沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系。公式表示:C/d2 =K(C=抗原濃度,d=沉淀環(huán)直徑,K=常數(shù))。
(2)Fehey曲線-適用于小分子抗原和較短時間(24小時)擴散的結(jié)果處理。使用半對數(shù)紙劃線,濃度的對數(shù)與沉淀環(huán)之間呈線性關(guān)系。公式表示:logC/d=K(C=抗原濃度,d=沉淀環(huán)直徑,K=常數(shù))。
結(jié)果:免疫球蛋白的含量用mg/ml表示,不同批號的參考血清其免疫球蛋白含量不一。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
巩义市| 柳河县| 屏东县| 马尔康县| 大渡口区| 宣城市| 莎车县| 大英县| 麦盖提县| 南开区| 普格县| 和平县| 梁河县| 江阴市| 宜兴市| 三江| 沧州市| 孙吴县| 陇川县| 清徐县| 中西区| 新平| 舒城县| 江达县| 和静县| 西丰县| 孟州市| 巩留县| 绥芬河市| 蓝山县| 德阳市| 宽城| 西林县| 武威市| 新干县| 苍梧县| 光山县| 永州市| 抚顺市| 泰和县| 桂阳县|