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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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ATCC細(xì)胞
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室*儀器簡單介紹2017/6/6
一、CO2培養(yǎng)箱CO2培養(yǎng)箱是轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的*儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO2培養(yǎng)箱的...
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)注意事項(xiàng)2017/6/1
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)注意事項(xiàng)1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;2.無菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3...
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的問題和解決方法2017/5/25
一、培養(yǎng)ATCC細(xì)胞不貼壁可能原因：胰蛋白酶消化過度支原體污染培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）細(xì)胞老化接種細(xì)胞起始濃度太低或太高解決方法：縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原...
介紹在細(xì)胞培養(yǎng)過程中經(jīng)常用到的培養(yǎng)用液有哪些2017/5/23
一、干細(xì)胞平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS):主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。主要用于取材時(shí)組織塊的漂洗、細(xì)胞的漂洗...
分析ATCC細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)注意事項(xiàng)2017/5/18
1.ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次...
分析干細(xì)胞的幾大特點(diǎn)2017/5/16
1.生命的起源細(xì)胞人體起源一個(gè)單細(xì)胞受精卵（*代干細(xì)胞），經(jīng)歷卵裂（干細(xì)胞持續(xù)擴(kuò)增，增加細(xì)胞數(shù)量）、胚層出現(xiàn)（干細(xì)胞開始分化出功能細(xì)胞）、組織器官形成（功能細(xì)胞的有序排列）及胚后發(fā)育這樣一個(gè)連續(xù)過程。...
ATCC細(xì)胞凍存的操作步驟2017/5/9
一、ATCC細(xì)胞材料（一）儀器1.凈化工作臺(tái)2.離心機(jī)3.恒溫水浴箱4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃）5.倒置相差顯微鏡6.培養(yǎng)箱7.液氮冰箱（二）玻璃器皿1.吸管（彎頭、直頭）2.培養(yǎng)瓶3.玻璃瓶...
細(xì)胞培養(yǎng)基常用幾種重要的添加成份及使用過程中應(yīng)注意的問題2017/5/4
酚紅在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑，一般情況下，可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值，中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色；但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中...
RNAi基因敲除的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用2017/4/27
RNAi基因敲除的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用①.干細(xì)胞比用同源重組法更加簡便，周期大大縮短。②.對(duì)于哺乳動(dòng)物，如對(duì)于一些敲除后小鼠在胚胎時(shí)就會(huì)死亡的基因，可以在體外培養(yǎng)的細(xì)胞中利用RNAi技術(shù)研究它的功能。③.由于R...
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)中各種器皿滅菌注意事項(xiàng)2017/4/25
1.ATCC細(xì)胞清洗玻璃制品時(shí)，浸酸之后一定要用自來水沖洗10—15次。因?yàn)闅埓娴南匆簩?duì)細(xì)胞粘附有很大影響。清洗塑料制品時(shí)要用棉花或柔軟紗布擦洗。千萬不要用硬毛刷，否則損害塑料表面后細(xì)胞不易貼壁。Ti...
分析細(xì)胞常見的消化液2017/4/20
ATCC細(xì)胞取材進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)常常需要將組織塊消化解離形成細(xì)胞懸液，傳代培養(yǎng)時(shí)也需要將貼壁細(xì)胞從瓶壁上消化下來，常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和edta溶液，有時(shí)也用膠原酶(collagen...
結(jié)晶紫檢測(cè)法檢測(cè)細(xì)胞生長2017/4/18
1．腫瘤細(xì)胞在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板各孔中加0.1ml含5×104～10×4WEHI-164細(xì)胞的培養(yǎng)液（含10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液），37℃5％CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2～3小時(shí)，讓細(xì)...
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作步驟2017/4/13
1.1轉(zhuǎn)化細(xì)胞細(xì)胞鋪板：將細(xì)胞按70%的匯合度接種到96孔板。1.2轉(zhuǎn)染：16h后轉(zhuǎn)染螢光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒和RNA，每個(gè)樣品設(shè)置6個(gè)復(fù)孔(1)配制DNA和轉(zhuǎn)染試劑:96孔板轉(zhuǎn)染質(zhì)粒時(shí)每孔比例為pLen...
小白鼠染色體的制備實(shí)驗(yàn)方法和步驟2017/4/11
(一)轉(zhuǎn)化細(xì)胞秋水仙素處理取骨髓前3～4小時(shí)先給小白鼠經(jīng)腹腔注入0.1％的秋水仙素，注射劑量為4毫克／每公斤動(dòng)物體重。(二)取骨髓經(jīng)秋水仙素處理的小白鼠，可用損傷脊髓法處死，然后用剪刀剪開大腿上的皮膚...
細(xì)胞凋亡的變化分析2017/4/6
轉(zhuǎn)化細(xì)胞凋亡大多為生理性死亡，是細(xì)胞衰老過程中各個(gè)細(xì)胞功能逐漸減退的結(jié)果。凋亡可見于許多生理和病理過程中，如各種更替性組織衰亡更新，也可見于照射及應(yīng)用細(xì)胞抑制劑和數(shù)目性萎縮之時(shí)。腫瘤細(xì)胞也發(fā)生凋亡。這...
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