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蒂科(上海)生物科技有限公司

血清產(chǎn)生沉淀該如何避免?

時(shí)間:2022-2-16閱讀:985

怎么樣才能避免血清中產(chǎn)生沉淀呢?首先我們需要了解下什么是血清以及血清的主要作用指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋原白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。


主要作用

1.提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。

2.提供激素和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。

3.提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。

4.提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。

5.對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x解毒中起重要作用,如SeO3,硒等

以下操作可以有效避免沉淀的產(chǎn)生:

(1) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,如果不是必要可以跳過(guò)此步驟。

(2) 如果必須做血清的熱滅活,一定要記住56℃30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。如果溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻都會(huì)導(dǎo)致沉淀物的增多。

(3)在解凍血清時(shí)隨時(shí)準(zhǔn)備搖晃均勻,使溫度及成分均一,這樣可以有效減少沉淀的發(fā)生。

(4) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。

(5) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。

(6) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。

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