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從五個(gè)步驟說說蛋白純化系統(tǒng)的純化方式

閱讀:999      發(fā)布時(shí)間:2022-5-17
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  蛋白純化系統(tǒng)能夠開展各種常用的純化技術(shù),如親和層析、離子交換層析、脫鹽和緩沖液交換,以及凝膠過濾。因此,這一系統(tǒng)可支持各種蛋白的純化,包括標(biāo)簽蛋白、抗體、無標(biāo)簽的或天然蛋白,以及樣品純化。
  蛋白純化系統(tǒng)是一種按分子量大小分離物質(zhì)的層析方法。該方法是把樣品加到充滿著凝膠顆粒的層析柱中,然后用緩沖液洗脫。大分子不能進(jìn)入凝膠顆粒中的靜止相中,只留在凝膠顆粒之間的流動(dòng)相中,因此以較快的速度首先流出層析柱,而小分子則能自由出入凝膠顆粒中,并很快在流動(dòng)相和靜止相之間形成動(dòng)態(tài)平衡,因此就要花費(fèi)較長(zhǎng)的時(shí)間流經(jīng)柱床,從而使不同大小的分子得以分離。
  蛋白純化系統(tǒng)純化方式是什么:
  1、沉淀。
  2、電泳:帶電蛋白質(zhì)是高于或低于它的等電點(diǎn),在電場(chǎng)中可被移動(dòng)到負(fù)電極或電場(chǎng)的正電極。支撐有薄膜電泳,電泳等。
  3、透析:利用兩個(gè)透析袋把大分子進(jìn)行蛋白質(zhì)與小分子有機(jī)化合物可以分開的方法。
  4、層析:離子交換色譜,利用蛋白質(zhì)的自由性質(zhì),特定的PH下,蛋白質(zhì)的電荷量和性質(zhì)不同,可以用離子交換色譜分離。陰離子交換色譜,負(fù)功率小的蛋白質(zhì)首先被洗脫。分子篩,也稱為凝膠過濾。細(xì)小的蛋白質(zhì)進(jìn)入毛孔,并在里面停留很長(zhǎng)時(shí)間。大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入毛孔并直接流出。
  5、超速離心:蛋白質(zhì)純化可用于確定分子量可以用作所述蛋白質(zhì)。其形成不同密度不同的蛋白質(zhì)是分離的。

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