玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱： 玉米赤霉烯酮ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品概述：玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又稱F-2毒素，是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物，具有雌激素樣作用，具有較強(qiáng)的生殖毒性和致畸作用，可引起動物發(fā)生雌激素亢進(jìn)癥，導(dǎo)致動物不孕或流產(chǎn)，對家禽、豬、牛和羊的影響較大，給畜牧業(yè)帶來很大的經(jīng)濟(jì)損失。

適用范圍

玉米赤霉烯酮ELISA檢測試劑盒可定性、定量檢測玉米、大米、麥類、啤酒等樣本中的玉米赤霉烯酮殘留量。

檢測限：0.2 ppb

試驗原理

采用競爭ELISA，在微孔板上預(yù)包被玉米赤霉烯酮抗原，加入樣本（或玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)品溶液）及辣根過氧化物酶標(biāo)記的玉米赤霉烯酮抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的玉米赤霉烯酮與預(yù)包被在板孔上的玉米赤霉烯酮抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記的玉米赤霉烯酮抗體。與樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的玉米赤霉烯酮結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時被除去。再加入TMB顯色，讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物玉米赤霉烯酮抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得出相應(yīng)殘留物玉米赤霉烯酮的含量。

試劑配制

1、樣品稀釋液：用去離子水將濃縮樣品稀釋液按1:9體積比進(jìn)行稀釋（1份濃縮樣品稀釋液+9份去離子水）。

2、洗滌工作液：用去離子水將濃縮洗滌液按1:9體積比進(jìn)行稀釋（1份濃縮洗滌液+9份去離子水）。

3、 50％甲醇水：取無水甲醇，用去離子水以1:1體積比例稀釋（1份無水甲醇＋1份水）。

4、40％甲醇水：取無水甲醇，用去離子水以1:1體積比例稀釋（4份無水甲醇＋6份水）

操作步驟

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷凍。

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml到對應(yīng)的微孔中，加入酶標(biāo)物50ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)15min。

6、小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液300ml/孔，充分洗滌5次，每次間隔30s，用吸水紙拍干。

7、加入顯色液100ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)15min。

8、加入終止液50ml/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔OD值。

注意事項:

1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3、每加一種試劑前需將其搖勻。

4、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

5、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6、儲存條件

   保存于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標(biāo)板微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7、試劑變質(zhì)的跡象

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。

8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為20～30min即可。若顏色較淺，可延長反應(yīng)時間到35min（或更長），但不得超過40min。反之，則減短反應(yīng)時間。

9、*反應(yīng)溫度為25℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

試劑盒組成

1、96孔酶標(biāo)板×1塊 

2、標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶：（1ml/瓶） 

0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb

3、酶標(biāo)物 1瓶  …………………………………………… 6ml

4、顯色液1瓶    ………………………………………  12ml 

5、終止液      ………………………………………6ml

6、濃縮洗滌液 （10×） ………………………………… 40ml

7、濃縮樣品稀釋液（10×） ……………………………… 40ml

貯藏條件及保存期

   貯藏條件：保存試劑盒于2～8℃。

       保存期：有效期為12個月。

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