酵母平板菌落转化试剂盒（一步法）
英文名:Yeast Transformation Kit
储存条件： -20 ℃储存，未开封期24个月。
描述:
酵母菌落转化试剂盒是以未经冻存的酿酒酵母平板菌落（摇菌）或者菌液作为菌体来源（短期4 ℃保存的平板或者菌液亦可使用），制备感受态细胞，分步热激，一步转化，整个操作流程在90 min内完成。省去了通过两次培养获得状态的菌体的过程，以及制备感受态的过程，节省了1-2天的菌种培养转化时间，或者购买感受态的经费。其转化率可达酵酿酒母转化方法（SK2400）的50-80%（常规酵母杂交菌种检测）。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。
菌落转化步骤：
1.在无菌的1.5 mL的离心管中加入100 μL的P1溶液（转化液）。
2.在上述转化液中加入1 μg的质粒DNA。共转加入每种质粒各1 μg。
3.挑取2-3个较大酵母菌落加入上述转化液中，震荡混匀。
4.置于42 ℃水浴60 min（每隔20 min 颠倒混匀一次，避免酵母菌沉底）。
5.可选步骤：3,000 rpm离心3 min，弃上清。用400 μL YPD Plus Liquid Medium（YT0004）重悬，30 ℃摇床震荡培养30-60 min。YPD Plus用于转化后复苏酵母菌，转化效率可以50-。
6.3,000 rpm离心3 min。加入100 μL无菌水重悬菌体。
7.将重悬菌体涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
8.30 ℃恒温培养3-5天，直至平板长出菌落。
菌液转化步骤：
收集1.5-3 mL酵母菌液沉淀后，加入100 μL P1溶液（转化液）和1 μg质粒DNA后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤4-8相同。
注意事项：
1. 转化全程要求无菌操作。
2. 为了转化效率，感受态不宜直接用液氮冻存。
3.增加酵母质粒的纯度和浓度可以转化效率。
供应产品目录：
| DO Supplement -Ade |
| DO Supplement -Ade/-His |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Lys |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-His/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-His/-Ura/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-Leu |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-His |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-Ura |
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yyp2021.2.22
酵母平板菌落转化试剂盒（一步法）
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