在疏水作用色譜也就是反相色譜中經(jīng)常能聽到的名詞，在實(shí)驗(yàn)過程中的表現(xiàn)形式為，對物質(zhì)沒有保留，出峰時間靠前，使得峰之間沒有保留。
案例
色譜柱：Ultimate® XB-C8 21.2×250mm，10μm。
流動相：近似純水。
第一天
正常活化進(jìn)樣色譜圖：
晚上不進(jìn)樣，由于流動相中沒有酸堿等添加劑，清洗自動進(jìn)樣器后關(guān)機(jī)。
第二天
直接流動相沖洗2倍柱體積進(jìn)樣色譜圖：
（中間已經(jīng)進(jìn)樣過30多針）
一切正常，由于實(shí)現(xiàn)了色譜柱自由，樣品也足夠干凈，為了下周一過來能更快做實(shí)驗(yàn)，仍然清洗自動進(jìn)樣器后關(guān)機(jī)。
周一
平衡2倍柱體積進(jìn)樣：
出峰異常沒有峰，懷疑色譜柱沒有平衡好，畢竟過了周末，沖多洗一段時間，出峰正常，但是出峰提前了2分鐘幾個雜質(zhì)峰均為分離。
排查原因：
1、流動相是否弄錯了；
2、儀器參數(shù)設(shè)置是否正常；
3、儀器實(shí)際流速是否正常。
均正常后，懷疑色譜柱相塌陷，雖然C8的極性較強(qiáng)，耐受高比例的水甚至純水，但是畢竟在近純水的環(huán)境中浸泡了48小時，80%乙腈水沖洗5倍柱體積，再進(jìn)樣正常。
知識點(diǎn)：反相色譜固定相。
例如：C18，C8，PHEYNL等耐受高比例的水甚至是純水，其實(shí)是指在這樣的流動相體系中不發(fā)生相塌陷，保留時間峰面積等都穩(wěn)定，不影響日常檢測。
在這個案例中，C8鍵合相在長時間浸泡在近純水的體系中仍然出現(xiàn)了相塌陷，因此，在較長時間不使用時還是需要用較高比例的有機(jī)溶劑水進(jìn)行沖洗保持。
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