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液相维护小贴士:紫外检测器篇

阅读:5889      发布时间:2021-11-18
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小伙伴们大家好,之前我们讨论了泵和进样器的维护之后,今天我们来聊聊检测器。

有人说Chemistry代表Chem is try很有意思?;У拿烂钤谟谒奈尴蘅赡苄浴V醒ЩЮ鲜υ倒敖峁咕龆ㄐ灾?,性质决定用途。"扩展到我们的分析工作中,也决定了分析手段,所有的分析都有规律可循,缘分“结构"注定!

在色谱实验室中紫外检测器是bi备的,70%以上的物质都可以用紫外检测器来分析,今天我们就扒一扒紫外可见检测器。


一、紫外检测器的原理

紫外-可见光检测器(UV-Vis Detector, UVD)是应用*泛的检测器,遵循的原理是朗勃比尔定律。

吸光度(A)=摩尔吸光度(ε)×光程(b)×浓度(c)。

吸光度定义为透射率的负对数,它是透射光与入射光的强度之比。

吸光度(A)= lg(1/透射率(T))。

紫外检测器的灵敏度与溶剂的影响、背景吸收、示差折光效应有关,不同种类溶剂有其截止波长,溶剂的质量好坏对其截止波长有影响,溶剂质量与含紫外吸收的杂质、溶解在其中的氧气、缓冲液溶质的紫外吸收等因素有关;背景吸收减少线性范围、许多溶剂会产生背景吸收。


微信截图_20211118143529.png

紫外可见检测器还有个Plus的兄弟——二极管阵列检测器。

光电二极管矩阵检测器简称PDA(Photo-Diode Array),有的品牌也称为DAD(Diode Array Detector),一般来说,紫外检测器比DAD的灵敏度高约1倍。但DAD也有它的优势,一是可以对未知物进行波长扫描确定最佳吸收波长,二是可以同时检测多个波长,三是可以进行峰纯度的检査。 


紫外检测器与DAD的区别为:紫外检测器是光源发出的光先分光,让特定波长的光通过狭缝,这样光的强度可以调节,然后通过流通池,光束被流通池里的样品吸收,未吸收的光达到光电二极管,产生电流变化,DAD光源发出的光不分光,让全波段波长的光通过狭缝,然后通过流通池,光束被流通池里的样品吸收,未吸收光被分光,各种波长的光落在不同位置的二极管上,各二极管产生电流变化。因为是后分光,所以DAD不同波长处光强度并不一致,波长分辨率也不及单波长的紫外检测器,需要通过其他手段来提高某些波长的灵敏度。

二、紫外检测器的优缺点


微信截图_20211118143607.png

三、紫外检测器的维护


紫外检测器出问题,通常是氘灯、流通池、光路问题,我们可自行解决的是换氘灯、清洗流通池。

以月旭科技Wisys5000 HPLC为例更换氘灯:

注意:

1、在开始下面描述的程序之前,拔下电源插头断开本单元的电源。只有在将上盖安装回其位置之后,该单元才可以重新连接到电源。

2、 紫外线对眼睛有害!断开设备电源!用螺丝刀 Torx T10 拧下灯罩盖。


微信截图_20211118143646.png

切勿用裸手触摸石英灯泡,因为在后来打开灯时指纹会不可避免地损坏灯。灯的位置在设备中精确确定,不需要进一步调整。灯更换后的组装步骤与拆卸相同,只是按相反的顺序。打开本机并点亮灯,如果没有发生错误,请关闭灯,然后进行新灯泡的校准。

更换钨灯的步骤近似,感兴趣的小伙伴可以单聊。


以Wisys5000为例清洗流通池窗片/更换流通池窗片

污染的流通池会降低光的传输,增加噪声,很难使信号归零。zui简单的清洗方法是用合适的溶剂冲洗拆除的流通池。清洗前必须从仪器取出流通池。根据污染物的特性选择互溶性系列的溶剂。它可以使用有机和无机溶剂和稀释酸溶液(如用1:10 到 1:20的稀硫酸或硝酸溶液)。此操作完成后用纯溶剂冲洗流通池。连接流通池到系统,当有液体流过时,观察是否泄漏。


微信截图_20211118143723.png

如果有必要更换有裂纹或受污染的窗片,或改变制备流通池的光学路径,拧下螺钉,拆下流通池盖并取出窗片和密封件。使用干燥的注射器往里推空气可以更好的移除密封的流通池窗片,不要用手触摸窗片。指纹会阻挡紫外线辐射的通道,并有可能损坏的窗片表面。将干净的窗片插入到流通池中,以便在流通池中调整所需的光路。检查垫片的完好情况 和密封件的密封面是否有窗片碎片或任何其他杂质。损坏的密封件须更换。

今天的话题就扒到这里了,下期见。


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