去內(nèi)毒素親和填料常見問題解答
內(nèi)毒素是一種常見的蛋白污染物，它的存在使得蛋白的活性研究變得十分復(fù)雜，并且內(nèi)毒素是一種對人類有害的化學(xué)物質(zhì)，它能引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克及播散性血管內(nèi)凝血等一系列不良癥狀，因此，檢測和去除蛋白中的內(nèi)毒素有著十分重要的意義。
月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 內(nèi)毒素親和填料以自制的瓊脂糖凝膠為基質(zhì)、多占菌素B為配基，用于去除生物源蛋白類產(chǎn)品（包括多肽、抗體、多糖等）中的內(nèi)毒素，但多占菌素B只對部分內(nèi)毒素有抑制作用，而不能抑制所有內(nèi)毒素。
1. 內(nèi)毒素去除效率低，應(yīng)當(dāng)怎么做？
①可能原因：樣品pH值不在內(nèi)毒素結(jié)合范圍。
解決方法：用0.1M NaOH或0.1M HCl調(diào)節(jié)pH至7-8。
②可能原因：樣品與填料接觸時間短。
解決方法：降低流速，增加樣品接觸時間。
③可能原因：檢測系統(tǒng)被內(nèi)毒素污染。
解決方法：確保所有試驗(yàn)用品均為無熱源產(chǎn)品。
④可能原因：內(nèi)毒素與目的蛋白結(jié)合較強(qiáng)。
解決方法：優(yōu)化樣品pH，使樣品能夠與內(nèi)毒素分離。
2. 樣品被污染，應(yīng)當(dāng)怎么做？
可能原因：該填料純化過其他樣品。
解決方法：增加接觸時間；不要用使用過的填料來去除不同樣品的內(nèi)毒素。
3.樣品回收率低，應(yīng)當(dāng)怎么做？
①可能原因：樣品非特異性吸附在填料上。
解決方法：增加樣品和平衡液中的NaCl濃度。
②可能原因：目的蛋白與內(nèi)毒素結(jié)合一起被去除。
解決方法：優(yōu)化樣品pH，使樣品與內(nèi)毒素分離。
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